EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應緩沖液進行配制1xEdU反應緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換EdU細胞增殖檢測試劑盒多少錢?上海東寰告訴您!河北哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好
以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測單細胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進行標記,且可同時使用其他標記進行檢測,操作安全簡便。適用于貼壁或懸浮細胞,冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測法不同,EdU-Click檢測,如EdU-Click594(BCK-EDU594)無需進行DNA變性來檢測摻入的EdU,而是通過一次快速、高度特異性的點擊反應,將EdU高效地摻入到新合成的DNA之中,通過EdU與不同熒光染料的特異性反應檢測DNA復制活性,從而確地反映細胞的增殖情況。這一類細胞增殖用熒光標記采用溫和的點擊實驗方案,準確且兼容各種抗體實驗方案,整個實驗可在30分鐘內(nèi)完成,在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面,堪比多重分析方法。浙江哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要組成部分。
蛋白抽提/WesternBlotting技術(shù)服務WesternBlotting技術(shù)服務(DH1004)一.服務內(nèi)容1、蛋白提?。簭娜嘶騽游锛毎⒔M織,細胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量:對樣品中蛋白進行半定量分析。3、WesternBlot檢測(1)電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品。(2)濕法轉(zhuǎn)印。(3)雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白。(4)顯色:ECL熒光顯色,黑條帶白背景照片4、提供蛋白內(nèi)參檢測(所有內(nèi)參抗體均不收取費用)。5、預實驗及正式實驗服務。二.樣品要求1、細胞>1×10^7;組織>30mg;細菌濕重>1mg等。2、樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品。3、建議提供目的蛋白陽性表達樣品(純蛋白、有陽性表達的細胞或組織、商品化的陽性對照產(chǎn)品等)作為陽性對照。注:若有特殊處理的樣品,請盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。三.收費標準服務項目免疫學檢測服務內(nèi)容周期產(chǎn)物/報告價格(元)DH1004-01樣品準備總蛋白提取、定量、質(zhì)控3天總蛋白質(zhì)控報告100元/樣DH1004-02免疫印跡(WB)WB預實驗,質(zhì)控WB體系5-10天完整實驗報告1000元/膜WB檢測正式實驗10-15天完整實驗報告1000元/膜四、客戶提供材料1、樣品:新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關(guān)的必要資料。
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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。山東品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好
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普遍應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性河北哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好