蘇州疾病動(dòng)物模型建模公司

卵巢早衰(pof)是指女性40歲前以閉經(jīng)、不育、雌***缺乏及促性腺***水平升高為特征的一種疾病。一般人群中發(fā)病率為1％～3％，在繼發(fā)性閉經(jīng)婦女中占4％～8％，在20歲以前的發(fā)病率為％。近年來pof在育齡婦女中的發(fā)生率有逐年升高且向年輕化發(fā)展的趨勢(shì)，由于卵巢早衰患者卵巢分泌的雌***量減少，即可導(dǎo)致一些其他疾病，如骨質(zhì)疏松、泌尿生殖道萎縮、脂質(zhì)代謝紊亂、心血管疾病。順鉑又稱順氯氨鉑、氯氨鉑、ddp、錫鉑，是目前常用的金屬鉑類絡(luò)合物，在分子中鉑原子對(duì)其抗**作用有重要意義。但只有順式才有意義，反式無效。其可與dna鏈交叉連接，顯示出細(xì)胞毒作用。溶解后在體內(nèi)無需載體轉(zhuǎn)運(yùn)，即可通過帶電的細(xì)胞膜。由于細(xì)胞內(nèi)氯離子濃度低(4mmol/l)，氯離子為水所取代，電荷呈陽性，具有類似烷化劑雙功能基團(tuán)的作用，可與細(xì)胞核內(nèi)dna的堿基結(jié)合，形成三種形式的交聯(lián)，造成dna損傷，破壞dna復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，高濃度時(shí)也抑制rna及蛋白質(zhì)的合成。順鉑具有抗*譜廣、乏氧細(xì)胞有效、作用性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，已普遍用于***睪丸*、卵巢*、子宮*、膀胱*、頸部*、前列腺*、腦*等，療效***。但順鉑用于****有一定的毒性，會(huì)引起副作用，與卵巢的損害有直接關(guān)系，有研究表明順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡。通過小鼠疾病模型的構(gòu)建有助于我們深入揭示潛在致病基因作用機(jī)制。蘇州疾病動(dòng)物模型建模公司

配制成6mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實(shí)驗(yàn)建立大鼠卵巢早衰模型1.實(shí)驗(yàn)儀器及材料：如表1所示。表12.實(shí)驗(yàn)方法：①動(dòng)物信息：sd大鼠，雌性，6-8周，體重180-220g。普通環(huán)境飼養(yǎng)，滅菌飼料飼養(yǎng)，自由飲水。②分組及給藥劑量：如表2所示。表2③給藥途徑及頻率：腹腔注射；2mg、3mg組連續(xù)注射7天；4mg、6mg組***天、第八天注射；對(duì)照組連續(xù)7天注射生理鹽水。④病理檢測(cè)：末次注射后15天，動(dòng)物麻醉，采集血液，分離血清，elisa法測(cè)定血清中e2、fsh、lh水平變化情況。解剖動(dòng)物，取卵巢組織稱重，對(duì)大鼠的卵巢組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行觀察。注射期間每天稱重，給藥后每周稱重兩次，每天進(jìn)行陰道涂片檢測(cè)動(dòng)情周期。3.統(tǒng)計(jì)方法：采用graphpad進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有計(jì)量資料均采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示采用單因素方差分析各組間均值的差異，p＜。4.試驗(yàn)結(jié)果：(3mg組注射完成后*存活一只，不進(jìn)行統(tǒng)計(jì))如表3、表4、圖1、圖2、圖3所示：①***水平：與空白組相比，2mg組、4mg組、6mg組e2水平均降低，但是只有2mg組有明顯降低(p＜)，如圖1所示；與空白組相比，2mg組、4mg組、6mg組fsh水平均上升，只有2mg組有明顯升高(p＜)，如圖2所示；與空白組相比。鎮(zhèn)江疾病動(dòng)物模型建模評(píng)價(jià)什么是疾病動(dòng)物模型建模？

動(dòng)物模型名稱：卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁致支氣管豚鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：豚鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：7~8周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：250~350g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法：卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁誘導(dǎo)。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白（OVA）+30mg氫氧化鋁（Al(OH)3）致敏。次致敏后第5天再致敏1次，共2次。一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只，豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中，給藥過程中對(duì)盆內(nèi)通O2。

麻醉小鼠，仰臥固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，頸部去毛后酒精消毒，切開皮膚，逐層暴露氣管，將1mL注射器經(jīng)兩氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端刺入氣管，回抽無阻力，則注入博萊霉素5mg/kg/L（對(duì)照組注入等量的生理鹽水）。手術(shù)完畢后迅速將動(dòng)物直立、旋轉(zhuǎn)，使藥液在肺內(nèi)分布均勻，動(dòng)物清醒后常規(guī)飼養(yǎng)。4.2模型鑒定及后續(xù)檢測(cè)：肺纖維化模型發(fā)展時(shí)間：給藥后第7天肺組織大多呈重度肺泡炎改變，肺泡腔及肺間質(zhì)內(nèi)有大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，部分肺泡腔破壞或消失，肺間隔內(nèi)成纖維細(xì)胞和增生，與正常肺組織對(duì)比差別明顯；給藥后第14天，肺纖維化開始形成。巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞明顯減少，成纖維細(xì)胞增多，肺泡間隔明顯增厚，有膠原沉積。給藥后第28天，多數(shù)小鼠發(fā)生彌漫性肺間質(zhì)纖維化，肺間質(zhì)被膠原纖維和成纖維細(xì)胞替代，肺泡壁破壞，肺大泡形成，但仍可見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。驗(yàn)性動(dòng)物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動(dòng)物。

技術(shù)領(lǐng)域：本發(fā)明屬于遺傳學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型，還涉及上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。背景技術(shù)：鼠源成對(duì)免疫球蛋白樣受體b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb，pirb)，是人類免疫球蛋白樣受體b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2，lilrb2)的同源基因，pirb基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的7號(hào)染色體近端，總大小為，編碼841個(gè)氨基酸，目前鑒定出15個(gè)外顯子，外顯子1起始密碼為atg，外顯子15的終止密碼子是tga(轉(zhuǎn)錄本：)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白，包含由六個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域(domain，d)組成(d1-d6)的胞外段，一個(gè)疏水的跨膜段，三個(gè)免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs，itims)和一個(gè)itims樣序列組成的胞內(nèi)段。理論上講，pirb的分子量約為92kd，但是western-blot分析中，pirb經(jīng)常位于105kd處，因?yàn)閜irb是糖蛋白。以往研究發(fā)現(xiàn)，pirb在免疫系統(tǒng)和中樞調(diào)節(jié)中均發(fā)揮重要作用。在免疫系統(tǒng)中，pirb在許多造血細(xì)胞都有表達(dá)，包括b細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞和樹突細(xì)胞，但是在胸腺細(xì)胞、成熟的t細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞不表達(dá)。避免了在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所帶來的風(fēng)險(xiǎn)。普陀區(qū)肺病疾病動(dòng)物模型建模

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物向小型化的發(fā)展趨勢(shì)更有利于實(shí)驗(yàn)者的日常管理和實(shí)驗(yàn)操作。蘇州疾病動(dòng)物模型建模公司

動(dòng)物模型名稱：淚腺摘除聯(lián)合新潔爾滅致干眼兔模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：1.8~2.5kg6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)，1、實(shí)驗(yàn)方法：摘除淚腺聯(lián)合新潔爾滅誘導(dǎo)。兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射進(jìn)速眠新Ⅱ進(jìn)行麻醉。麻醉后，進(jìn)行淚腺摘除手術(shù)，眼瞼局部以75％酒精消毒，鋪洞巾，于眼下眶周部做一切口，小心分離皮膚、肌肉、筋膜，尋找到淚腺后完整摘除之，然后縫合創(chuàng)口。術(shù)畢，滴妥布霉素**眼液2滴、涂四環(huán)素可的松眼藥膏，共7d。術(shù)后兔創(chuàng)口愈合后進(jìn)行給藥造模。眼滴0.1%新潔爾滅溶液，2次/天，2滴/次，連續(xù)用藥14d。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：SchirmerI試驗(yàn)淚液分泌減少，1%虎紅角膜染色試驗(yàn)虎紅著色評(píng)分值高，角膜出現(xiàn)病理改變。蘇州疾病動(dòng)物模型建模公司