快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)毒性分析

德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細(xì)胞的效率。LentiBOOST 是一種無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，用于臨床前和臨床應(yīng)用。作為一種普遍作用的（受體非依賴型）佐劑，可應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細(xì)胞類型，CD34+造血干細(xì)胞（HSCs）、原代 T 細(xì)胞和 NK 細(xì)胞等，對難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠 T 細(xì)胞亦有效。LentiBOOST 已成為改進(jìn)體外 (ex vivo) 基因zhi liao和 CAR-T 細(xì)胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的選擇。近幾年LentiBOOST作為一種無毒性的化學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑guang fan引起關(guān)注。LentiBOOST通過與細(xì)胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。研究證實(shí)LentiBOOST在不影響轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞存活、增殖及分化能力的前提下，提高小鼠T細(xì)胞、HSCs和人HSCs的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。

為提供更好的服務(wù)，上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor，LentiBOOST在中國市場的營銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負(fù)責(zé)。 加入什么試劑可以提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率？快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)毒性分析

研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，且對細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案，具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。細(xì)胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響，良好的生長狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證，一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！更多技術(shù)文章歡迎關(guān)注曼博生物公眾號：Mine-bio快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)毒性分析加入什么試劑可以提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率？

First代慢病毒載體以Naldini以及Kafri[2]構(gòu)建的三質(zhì)粒系統(tǒng)為dai biao。該載體系統(tǒng)由包裝質(zhì)粒、包膜質(zhì)粒及載體質(zhì)粒3種質(zhì)粒組成。二代慢病毒載體系統(tǒng)是在di yi代基礎(chǔ)上改進(jìn)的，在包裝質(zhì)粒中刪去了HIV的所有附屬基因vif、vpu、vpr和nef，以減少產(chǎn)生RCR的風(fēng)險(xiǎn)。這些附屬基因的去除并不影響病毒的滴度和轉(zhuǎn)染能力，同時增加了載體的安全性。第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個安全特性：一是構(gòu)建了自身失活的慢病毒載體，即刪除了U3區(qū)的3’ LTR，使載體失去HIV-1增強(qiáng)子及啟動子序列，即使存在所有的病毒蛋白也不能轉(zhuǎn)錄出RNA；二是去除了tat基因，代之以異源啟動子序列，這樣原始的HIV基因組中的9個基因在慢病毒載體中只保留了3個（gag、pol和rev） ，因此第三代慢病毒載體系統(tǒng)更加安全。與第三代系統(tǒng)相比，第二代慢病毒系統(tǒng)使用更多的HIV蛋白（在較少的質(zhì)粒上）以產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。

Lentiboost可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，高達(dá)90%以上，研究證明對于細(xì)胞增殖無不良影響，且在T細(xì)胞中觀察到一定的促增殖效果。可減少M(fèi)OI，從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的數(shù)量，但不會過度增加單個細(xì)胞病毒載體拷貝數(shù)（VCN），符合FDA/EMA對ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑，通過降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合，提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中，并有相關(guān)藥物已上市銷售。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，歡迎咨詢上海曼博生物！也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多LentiBOOST技術(shù)文章：Mine-bio慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)有限制條件嗎？

產(chǎn)品簡介：LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑，通過降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合，提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中，并有相關(guān)藥物已上市銷售。產(chǎn)品特點(diǎn)：1.增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，可高達(dá)90%—提高zhi liao蛋白表達(dá)量，有利于取得臨床試驗(yàn)成功2.減少M(fèi)OI低至2倍，從而降低COGS（Costofgoodssold）——減少Lentivirus的用量和物料成本3.控制單個細(xì)胞中的病毒載體拷貝數(shù)（VCN，VirusCopyNumber）——符合FDA/EMA對ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)4.易于使用——無需改變現(xiàn)有轉(zhuǎn)導(dǎo)流程，兼容已經(jīng)開發(fā)流程5.提供研究級和GMP級——GMP級具有臨床試驗(yàn)的所有必備文件6.30多種應(yīng)用LentiBOOST的藥物已在美國和歐洲進(jìn)入臨床試驗(yàn)（PhaseIII和PhaseI/II）階段——加速了IND文件歸檔。什么是慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑？快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)毒性分析

什么試劑可以增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率?快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)毒性分析

影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個關(guān)鍵參數(shù)是gan ran復(fù)數(shù)（MOI）,MOI指的是每個細(xì)胞gan ran的病毒粒子個數(shù)，病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示。慢病毒的gan ran能力隨細(xì)胞類型的不同而不同，因此每種不同的細(xì)胞類型需要不同的MOI。MOI值越大，慢病毒gan ran上的可能性也越大，gan ran效率越高，但對細(xì)胞的毒性也越大。另外細(xì)胞需要的MOI值越大，也說明細(xì)胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo)。慢病毒gan ran時間也相當(dāng)重要，gan ran后換液太早會導(dǎo)致gan ran效率下降;gan ran后換液太晚，則對細(xì)胞的損傷太大，效率也不高。一般在gan ran后24h換液，如果慢病毒對細(xì)胞產(chǎn)生了明顯的毒性，可根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)及時提前換液。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)毒性分析