在基因工程的微觀世界中,AciI酶猶如一位精細(xì)的“導(dǎo)航員”,為科學(xué)家們?cè)趶?fù)雜而浩瀚的基因海洋中指引著方向。它是一種限制性核酸內(nèi)切酶,憑借其獨(dú)特的識(shí)別序列和切割能力,成為現(xiàn)代替物技術(shù)中不可或缺的工具之一。AciI酶的識(shí)別序列是“CC^CAGAGG”,這一序列在DNA分子中相對(duì)罕見(jiàn),使得AciI在切割過(guò)程中展現(xiàn)出極高的特異性。它會(huì)在識(shí)別到該序列后,精確地在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷,這種切割方式能夠產(chǎn)生黏性末端,為后續(xù)的基因重組提供了便利條件。在基因工程中,AciI酶的精細(xì)切割能力被廣泛應(yīng)用于基因克隆和重組DNA的構(gòu)建??茖W(xué)家們可以利用AciI酶將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來(lái),就像從一座巨大的寶藏中找到那顆比較好珍貴的寶石。隨后,通過(guò)DNA連接酶,將切割后的基因片段與載體DNA連接起來(lái),構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。AciI酶的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過(guò)觀察AciI酶對(duì)不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。在泛素化過(guò)程中,首先泛素激起酶E1(Uba1或其他)在ATP的存在下激起泛素分子,形成E1-泛素硫酯中間體。Recombinant Human MASP3 Protein,His Tag
RecombinantHumanS100A14Protein,HisTag——炎癥微環(huán)境與病轉(zhuǎn)移研究的精細(xì)探針S100A14屬EF-手型鈣結(jié)合蛋白家族,在宮頸、乳腺及結(jié)直腸病中呈差異表達(dá),既能以Ca2?依賴(lài)方式調(diào)控p53通路,又可分泌至胞外誘導(dǎo)EMT與血管新生。本品在大腸桿菌系統(tǒng)可溶性表達(dá),覆蓋全長(zhǎng)成熟肽(aa1-104),N端6×His標(biāo)簽經(jīng)Ni2?親和與離子交換兩步純化,SDS-PAGE與SEC-HPLC雙驗(yàn)證純度≥98%,內(nèi)素<0.1EU/μg,確保體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)安全。鈣滴定實(shí)驗(yàn)顯示,其結(jié)合Ca2?后疏水區(qū)暴露,疏水熒光探針ANS熒光增強(qiáng)3.8倍,Kd≈0.8mM;在共培養(yǎng)模型中,100ng/mL重組S100A14可明顯促進(jìn)HUVEC管腔形成,并增強(qiáng)MDA-MB-231細(xì)胞侵襲力。HisTag兼容ELISA、SPR及免疫組化,便于快速篩選中和抗體或拮抗肽。該蛋白為解析S100A14介導(dǎo)的炎癥-病對(duì)話及靶向治開(kāi)發(fā)提供了高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究工具。Recombinant Human MASP3 Protein,His Tag將MAGE-A3基因序列克隆到一個(gè)表達(dá)載體中,該載體通常包含有抗生物質(zhì)抗性基因、啟動(dòng)子、核糖體結(jié)合位點(diǎn)。
在基因工程的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是科學(xué)家們不可或缺的工具,而AvaII便是其中一位“關(guān)鍵刻刀”。它以其獨(dú)特的識(shí)別序列和精細(xì)的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。AvaII的識(shí)別序列是“G^GWCC”,其中“W”突出腺嘌呤(A)或胸腺嘧啶(T)。這種序列的識(shí)別特性使得AvaII能夠在特定位置進(jìn)行切割,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得AvaII在基因克隆和重組DNA構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AvaII的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來(lái),再通過(guò)DNA連接酶將切割后的基因片段與載體DNA連接起來(lái),構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割能力使得AvaII成為處理復(fù)雜基因組時(shí)的理想選擇。AvaII的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過(guò)觀察AvaII對(duì)不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。例如,在某些遺傳病的研究中,AvaII可以用來(lái)檢測(cè)基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。AvaII的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學(xué)領(lǐng)域的一大進(jìn)步。
重組人Kremen-2蛋白(Recombinant Human Kremen-2 Protein, His Tag)是一種重要的細(xì)胞表面受體,屬于Kremen家族,主要參與調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路。Kremen-2蛋白通過(guò)與Dickkopf(DKK)蛋白協(xié)同作用,抑制Wnt信號(hào)通路的啟動(dòng),從而在胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、組織穩(wěn)態(tài)及病發(fā)生等過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該重組蛋白采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N(xiāo)端融合了His標(biāo)簽,便于通過(guò)Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計(jì)不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,如ELISA、Western blot、免疫沉淀及蛋白相互作用研究等。研究表明,Kremen-2在多種病中表達(dá)異常,與腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外,Kremen-2還參與調(diào)控骨代謝和神經(jīng)發(fā)育等生理過(guò)程。因此,重組人Kremen-2蛋白不僅是研究Wnt信號(hào)通路的重要工具,也為開(kāi)發(fā)相關(guān)疾病的治藥物提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價(jià)值。在對(duì)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化后的DNA進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),Hot-Start Taq DNA Polymerase能夠提供高特異性和高靈敏度的擴(kuò)增效果。
人類(lèi)SG3(Secreted Glycoprotein 3)是近年于胎盤(pán)外泌體中發(fā)現(xiàn)的Ⅰ型分泌蛋白,富含O-GalNAc糖簇,與胚胎著床、病遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移及代謝炎癥密切相關(guān),卻因天然豐度極低而研究受阻。本重組人SG3(aa 20-310)采用CHO-3E 懸浮平臺(tái),經(jīng)密碼子優(yōu)化與Kifunensine 處理保留高甘露糖型,C端6×His 標(biāo)簽經(jīng)Ni-NTA、ConA 親和與SEC 三步純化,SDS-PAGE呈彌散單條帶,質(zhì)譜糖譜顯示五糖關(guān)鍵+2 N-糖基,純度≥97%,內(nèi)素<0.02 EU/μg,可直接用于小鼠尾靜脈成像。功能驗(yàn)證:BLI 測(cè)得SG3 與胎盤(pán)外泌體膜蛋白Integrin α5β1 的親和力KD=12 nM;在THP-1 巨噬細(xì)胞模型中,100 ng/mL 重組SG3 誘導(dǎo)IL-10 上調(diào)3.8 倍,同時(shí)抑制LPS 觸發(fā)的TNF-α 釋放50%,提示其抗-促修復(fù)雙重功能。His 標(biāo)簽支持SPR、ELISA 及免疫組化,可高通量篩選SG3-受體拮抗肽或糖基化酶抑制劑。該蛋白為解決SG3 在母胎界面及病微環(huán)境中的“糖密碼”提供了高活性、可放大的研究級(jí)試劑。T4 DNA 聚合酶是一種模板依賴(lài)的 DNA 聚合酶,需要特定的 DNA 模板才能進(jìn)行 DNA 合成反應(yīng)。Recombinant Cynomolgus Transferrin R/CD71 Protein,His Tag
由于其高活性,pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶允許從極少量的細(xì)胞中進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如單細(xì)胞水平的研究。Recombinant Human MASP3 Protein,His Tag
重組人KIR2DL1蛋白(Recombinant Human KIR2DL1 Protein, His-Avi Tag)是一種重要的免疫調(diào)節(jié)蛋白,屬于殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(Killer-cell Immunoglobulin-like Receptor, KIR)家族成員,主要表達(dá)于自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)和部分T細(xì)胞表面。KIR2DL1通過(guò)識(shí)別并結(jié)合靶細(xì)胞表面的HLA-C分子,傳遞抑制性信號(hào),從而調(diào)控NK細(xì)胞的殺傷活性,在免疫耐受、抗病毒免疫及病免疫監(jiān)視中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該重組蛋白采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其正確的折疊與糖基化修飾,保留了天然蛋白的生物活性。其N(xiāo)端融合了His標(biāo)簽,便于通過(guò)Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化;同時(shí)帶有Avi標(biāo)簽,可在體內(nèi)或體外通過(guò)生物素連接酶實(shí)現(xiàn)特異性生物素化,極大提高了其在ELISA、表面等離子共振(SPR)及流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用靈活性。KIR2DL1在免疫治研究中具有重要意義,尤其在NK細(xì)胞功能調(diào)控、病免疫逃逸機(jī)制及個(gè)體化免疫治策略開(kāi)發(fā)中受到廣關(guān)注。重組人KIR2DL1蛋白為研究NK細(xì)胞與靶細(xì)胞相互作用、篩選KIR-HLA阻斷劑及開(kāi)發(fā)新型免疫檢查點(diǎn)抑制劑提供了可靠工具,具有重要的科研與臨床轉(zhuǎn)化價(jià)值。Recombinant Human MASP3 Protein,His Tag