One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus):高效、防污染的RNA定量檢測解決方案One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) 是一種為探針法實時熒光定量PCR(qPCR)設計的一步法試劑盒,適用于以RNA為模板的高靈敏度定量檢測。該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應集成在同一反應管中,簡化了實驗操作,降低了污染風險,同時引入了UDG防污染系統(tǒng),確保檢測的特異性和準確性。產(chǎn)品特點高效逆轉(zhuǎn)錄與擴增:采用耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶,能夠在寬廣的定量范圍內(nèi)提供穩(wěn)定的擴增性能。防污染設計:含有dUTP和UDG酶,可在反應前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止氣溶膠污染。操作簡便:逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應在同一管中完成,無需額外開蓋或移液,減少了操作步驟和污染風險。多重檢測能力:支持多重qPCR反應,可在同一反應中同時檢測多個目標基因。高靈敏度:檢測靈敏度可達極低的RNA模板量(<5拷貝/反應),適用于微量RNA的檢測。應用場景病毒檢測:適用于RNA病毒(如病毒、流感病毒等)的快速定量檢測。基因表達分析:用于定量檢測特定基因的表達水平,尤其適合低豐度基因。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測,能夠明顯提高檢測效率。Pfu DNA Polymerase的熱穩(wěn)定性和保真性使其在優(yōu)化PCR條件時更為靈活,比如在GC含量較高的模板中。Recombinant Mouse MCP-3/CCL7
在分子生物學實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性與實時監(jiān)測功能的選擇。這種預混液不僅繼承了Phusion DNA聚合酶的高保真特性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段,極大地提升了實驗效率和準確性。Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Phusion DNA聚合酶以其保真性而聞名,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實驗的推薦工具。同時,Phusion酶的延伸速度可達15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,提高了實驗效率。熒光染料的加入是該預混液的一大亮點。這種染料能夠在PCR過程中實時監(jiān)測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。實驗人員無需額外添加染料或進行復雜的后處理,即可直接在PCR儀上觀察擴增曲線,從而實現(xiàn)快速、準確的定量分析。這種設計不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的誤差。此外,Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。Cas9 NLS (SpCas9-NLS)Cas12a不僅具有順式切割活性,還具備獨特的反式切割活性,這使得它能夠無差別地裂解附近的單鏈DNA。
高靈敏度與特異性該試劑采用了優(yōu)化的反應緩沖體系和抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,能夠顯著提高擴增效率和特異性。即使在低拷貝數(shù)的模板條件下,也能實現(xiàn)穩(wěn)定檢測,例如某些產(chǎn)品可在3 copies/反應的水平下實現(xiàn)穩(wěn)定檢出。此外,該試劑還通過添加抑制非特異性擴增的因子,進一步提升了多重反應的準確性。2. 高效的多重檢測能力Multiplex Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 支持在同一反應體系中進行多達四重的靶基因檢測。這種多重檢測能力極大地提高了實驗效率,減少了樣本用量和檢測時間,特別適用于需要同時檢測多個基因或病原體的場景。3. 強大的防污染系統(tǒng)試劑中包含的dUTP/UDG系統(tǒng)能夠有效防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染,從而避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。UDG酶在室溫下即可發(fā)揮作用,確保實驗數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。4. 快速擴增與操作簡便該試劑支持快速擴增程序,可在短時間內(nèi)完成qPCR反應,例如某些產(chǎn)品可在35分鐘內(nèi)完成45個循環(huán)。同時,2×預混液的設計使得實驗操作更加簡便,只需加入模板、引物和探針即可進行反應。
One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus):高效、特異且防污染的RNA定量檢測解決方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 是一種為RNA模板設計的一步法實時熒光定量PCR(qPCR)試劑盒,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和UDG防污染系統(tǒng),能夠在同一反應管中完成逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應,操作簡便且高效。產(chǎn)品特點高靈敏度與特異性:采用優(yōu)化的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合SYBR Green I染料,能夠高效檢測低豐度RNA模板,同時減少非特異性擴增。UDG防污染系統(tǒng):含有dUTP和UDG酶,可在反應前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止氣溶膠污染。操作簡便:逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應在同一管中完成,減少了操作步驟和污染風險。兼容性強:適用于多種qPCR儀器,支持快速反應程序。應用場景基因表達分析:用于定量檢測特定基因的表達水平。病毒檢測:適用于RNA病毒的快速檢測,如流感病毒、病毒等。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點,成為分子生物學研究和臨床檢測中的重要工具,尤其適用于需要快速、準確檢測RNA樣本的場景。FnCas12a不僅可用于體外dsDNA的特異剪切,也可用于靶標核酸的快速檢測,如HOLMES核酸快檢技術(shù)。
Uracil-DNA Glycosylase (E. coli) (5U/μl):高效去除尿嘧啶的分子生物學工具Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一種來源于大腸桿菌的重組酶,能夠高效催化DNA鏈中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖骨架之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對單鏈和雙鏈DNA均有效,但對RNA或短于6個堿基的DNA寡核苷酸無活性。產(chǎn)品特點UDG酶的主要特點是能夠在PCR反應中有效防止產(chǎn)物污染。通過在PCR反應中摻入dUTP替代dTTP,生成含有dU的DNA產(chǎn)物,UDG可以特異性降解這些含dU的DNA,從而避免PCR產(chǎn)物的交叉污染。此外,UDG酶在較寬的pH范圍內(nèi)具有活性,適pH為8.0,且不需要二價陽離子。應用場景UDG酶廣泛應用于以下領(lǐng)域:PCR產(chǎn)物防污染:通過降解含dU的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導致的假陽性結(jié)果。單核苷酸多態(tài)性檢測:用于檢測基因組中的單核苷酸變異?;蚓庉嬇c位點特異性突變:用于制備和處理含有dU的DNA模板。蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究:通過去除尿嘧啶,研究DNA修復機制。在PCR反應中,UDG酶的推薦使用濃度為0.01U/μl,通常在反應體系中加入適量的UDG Buffer以確保比較好活性。此外,UDG酶在RT-PCR中需謹慎使用,因為其可能消化新合成的cDNA。其耐血能力可達20%-50%,在20 μL的PCR體系中,通??杉尤?-4 μL的全血樣本。Recombinant Cynomolgus Her2/ErbB2 Protein,His Tag
預混液中的高保真DNA聚合酶具有3'-5'外切酶活性,能夠有效降低錯誤率,提高擴增產(chǎn)物的準確性。Recombinant Mouse MCP-3/CCL7
產(chǎn)品特點50× ROX Reference Dye的主要成分是高純度的5-ROX甘氨酸,其濃度為25 μM,以50倍濃縮的形式提供。這種染料的熒光強度在PCR過程中保持穩(wěn)定,不會因擴增反應而發(fā)生變化,因此可以作為理想的內(nèi)部參考信號。其激發(fā)波長為575 nm,發(fā)射波長為602 nm,與多數(shù)qPCR儀器的光學系統(tǒng)兼容。此外,ROX Reference Dye具有良好的化學穩(wěn)定性,能夠在-20℃避光保存長達2年,短期使用時可在4℃保存。這種穩(wěn)定性使其在實驗中能夠提供一致的熒光信號,減少因試劑變質(zhì)導致的實驗誤差。性能優(yōu)勢校正孔間誤差:qPCR實驗中,由于加樣量、孔位置、試管壁厚度等因素,不同孔之間的熒光信號可能存在差異。50× ROX Reference Dye能夠通過校正這些非PCR相關(guān)的變化,顯著提高定量的精確度。提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性:通過使用ROX染料對數(shù)據(jù)進行歸一化處理,實驗人員可以在較少的重復實驗中獲得更精確的結(jié)果,從而節(jié)省時間和資源。適用于多種儀器:50× ROX Reference Dye兼容多種主流qPCR儀器,如ABI 5700、7000、Recombinant Mouse MCP-3/CCL7