清醒動物多光子顯微鏡代理

來源: 發(fā)布時間:2025-07-05

2020年,JianglaiWu等人提出提高2PM橫向掃描速率的裝置,稱為FACED(free-spaceangular-chirp-enhanceddelay)。圓柱透鏡將激光束一維聚焦,會聚角為Δθ。光束進入到一對幾乎平行的高反射鏡中,其間距為S,偏角為α。經過反射鏡多次反射后,激光脈沖被分成多個傳播方向不同的子脈沖(N=Δθ/α),脈沖間以2S/c的時間延遲(c,光速)回射。FACED模塊輸出處的子脈沖序列可以看作從虛擬光源陣列發(fā)出的光,這些子脈沖在中繼到顯微鏡物鏡后形成了一個空間上分離且時間延遲的焦點陣列。然后將該模塊并入具有高速數據采集系統的標準雙光子熒光顯微鏡中。光源是具有1MHz重復頻率的920nm的激光器,通過FACED模塊可產生80個脈沖焦點,其脈沖時間間隔為2ns。這些焦點是虛擬源的圖像,虛擬源越遠,物鏡處的光束尺寸越大,焦點越小。光束沿y軸比x軸能更好地充滿物鏡,從而導致x軸的橫向分辨率為0.82μm,y軸的橫向分辨率為0.35μm。多光子顯微鏡市場集中,由于投產生產的成本較高,技術難度大,目前涌現的新企業(yè)不多。清醒動物多光子顯微鏡代理

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針對雙光子熒光顯微鏡的特點,從理論上分析雙光子成像特點,并搭建一套時間、空間分辨率高,能實時、動態(tài)、多參數測量的雙光子熒光顯微鏡系統。具體系統應實現∶(1)能對不同染料的雙光子熒光進行探測;(2)用特定染料對樣品標記以后,能實現雙光子熒光的三維成像;(3)通過實驗的研究,改進雙光子熒光顯微成像系統;(4)在保證成像質量的前提下,簡化整個系統,使得實驗操作方便、安全。單光子激發(fā)熒光的過程,就是熒光分子吸收一個光子,從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),躍遷以后,能量較大的激發(fā)態(tài)分子,通過內轉換把部分能量轉移給周圍的分子,自己回到比較低電子激發(fā)態(tài)的比較低振動能級。處于比較低電子激發(fā)態(tài)的比較低振動能級像在生物醫(yī)學光學成像研究中顯示了較大的優(yōu)勢。而在顯微成像中,雙光子熒光顯微鏡憑其獨有的優(yōu)點,成為研究細胞結構和功能檢測的重要工具。多光子顯微鏡成像分辨率中國市場多光子顯微鏡產量、消費量、進出口分析及未來趨勢。

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多光子激光掃描顯微鏡的產業(yè)發(fā)展,世界多光子激光掃描顯微鏡產業(yè)主要分布在德國和日本,德國以徠卡顯微系統和蔡司為基礎,日本以尼康和奧林巴斯為基礎。2020年以來,這些企業(yè)占據了全球多光子激光掃描顯微鏡市場的64.44%,它們的發(fā)展策略影響著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向。目前,世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求正在增長,中國市場的需求增長更快。未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將仍有巨大的發(fā)展?jié)摿Α?/p>

光學成像技術與分子生物學技術的結合為研究上述科學問題提供了條件與可能。因此,在現代分子生物學技術基礎上,急需發(fā)展新的成像技術。在動物體內,如何實現基因表達及蛋白質之間相五作用的實時在體成像監(jiān)測是當前迫切需要解決的重大科學技術問題。這是也生物學、信息科學(光學)和基礎臨床醫(yī)學等學科共同感興趣的重大問題。對這-一一科學問題的研究不僅有助于闡明生命活動的基本規(guī)律、認識疾病的發(fā)展規(guī)律,而且對創(chuàng)新藥物研究、藥物療效評價以及發(fā)展疾病早期診斷技術等產生重大影響。多光子顯微鏡技術是對完整組織進行深層熒光成像的優(yōu)先技術。

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2020年,TonmoyChakraborty等人提出了加速2PM軸向掃描速度的方法[2]。在光學顯微鏡中,物鏡或樣品緩慢的軸向掃描速度限制了體成像的速度。近年來,通過使用遠程聚焦技術或電調諧透鏡(ETL)已經實現了快速軸向掃描。但遠程對焦時對反射鏡的機械驅動會限制軸向掃描速度,ETL會引入球差和高階像差,無法進行高分辨率成像。為了克服這些限制,該小組引入了一種新的光學設計,可以將橫向掃描轉換為無球面像差的軸向掃描,以實現高分辨率成像。有兩種方法可以實現這種設計。***個可以執(zhí)行離散的軸向掃描,另一個可以執(zhí)行連續(xù)的軸向掃描。如圖3a所示,特定裝置由兩個垂直臂組成,每個臂具有4F望遠鏡和物鏡。遠程聚焦臂由振鏡掃描鏡(GSM)和空氣物鏡(OBJ1)組成,另一個臂(稱為照明臂)由浸沒物鏡(OBJ2)組成。兩個臂對齊,使得GSM與兩個物鏡的后焦平面共軛。準直后的激光束經偏振分束器反射進入遠程聚焦臂,由GSM進行掃描,使OBJ1產生的激光焦點可以進行水平掃描。多光子顯微鏡已經被生物學家普遍的運用于實驗中。美國模塊化多光子顯微鏡Ultima Investigator

世界多光子激光掃描顯微鏡產業(yè)主要布局在德國和日本,德國是徠卡顯微系統和蔡司。清醒動物多光子顯微鏡代理

多光子顯微優(yōu)點:☆光損傷?。河捎陔p光子顯微鏡使用的是可見光或近紅外光作為激發(fā)光源,這一波段的光對細胞和組織的光損傷小,適用于長時間的研究;☆穿透能力強:相對于紫外光,可見光和近紅外光都具有更強的穿透能力,因而受生物組織散射的影響更小,解決對生物組織中深層物質的層析成像研究問題;☆高分辨率:由于雙光子吸收截面很小,只有在焦平面很小的區(qū)域內可以激發(fā)出熒光,雙光子吸收*局限于焦點處的體積約為波長3次方的范圍內;☆漂白區(qū)域?。河捎诩ぐl(fā)只存在于交點處,所以焦點以外的區(qū)域都不會發(fā)生光漂白現象;☆熒光收集率高:與共聚焦成像相比,雙光子成像不需要光學濾波器,這樣就提高了對熒光的收集率,而收集率的提高直接導致圖像對比度的提高;☆圖像對比度高:由于熒光波長小于入射波長,因而瑞利散射產生的背景噪聲只有單光子激發(fā)時的1/16,降低了散射的干擾;☆光子躍遷具有很強的選擇激發(fā)性,所以可以對生物組織中一些特殊物質進行成像研究;☆避免組織自發(fā)熒光的干擾,獲得較強的樣品熒光:生物組織中的自發(fā)熒光物質的激發(fā)波長一般在350~560nm范圍內,采用近紅外或紅外波段的激光作為光源,能**降低生物組織對激發(fā)光吸收。清醒動物多光子顯微鏡代理