微生物培養(yǎng)基制備:溶解滅菌后,盤子上無(wú)不溶性結(jié)晶紫、無(wú)紫色斑;與未溶解和消毒的盤子相比,盤子上有結(jié)晶紫和紫色斑點(diǎn)。因此正確的步驟順序是在高壓滅菌前需要進(jìn)行培養(yǎng)基煮沸溶解。先煮沸溶解后冷卻至二十五度,確定pH值;對(duì)需要高壓滅菌的介質(zhì)取平均值,高壓滅菌后冷卻至二十五度,這兩種狀況測(cè)量培養(yǎng)基pH值,固體培養(yǎng)基至少檢測(cè)兩個(gè)點(diǎn),取它們的平均值??刂婆囵B(yǎng)基在容器中不要超過(guò)百分之八十,避免填充過(guò)多。注意控制高壓滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過(guò)121度,而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長(zhǎng)時(shí)間存放。快速冷卻減少培養(yǎng)基暴露于環(huán)境的時(shí)間,避免空氣中微生物污染。廣西Systec培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配置原則:控制氧化還原電位不同類型微生物生長(zhǎng)對(duì)氧化還原電位(F)的要求不一樣,一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時(shí)可正常生長(zhǎng),一般以+0.3—+0.4V為宜,厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長(zhǎng),兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時(shí)進(jìn)行好氧呼吸,在+0.1V以下時(shí)進(jìn)行發(fā)酵。F值與氧分壓和pH有關(guān),也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對(duì)穩(wěn)定的條件下,可通過(guò)增加通氣量(如振蕩培養(yǎng)、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,從而增加F值;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值。遼寧培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試培養(yǎng)基制備器使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無(wú)菌添加.
配制培養(yǎng)基的原則:控制培養(yǎng)基的條件,控制培養(yǎng)基的pH配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。各大類微生物要求的適宜生長(zhǎng)pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0,細(xì)菌為6.5-7.5.放線菌為7.5-8.5.培養(yǎng)基的pH與其C/N有極大關(guān)系。C/N高的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)各種的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后其pH明顯下降;相反,C/N低的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)一般細(xì)菌的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后,其pH則明顯上升。這是由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗與代謝產(chǎn)物的積累,改變了培養(yǎng)基的pH,若不及時(shí)控制,將導(dǎo)致菌體生長(zhǎng)停止。
在制備培養(yǎng)基的過(guò)程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過(guò)一定的處理,洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝,經(jīng)過(guò)滅菌等準(zhǔn)備就緒后,才能使用。新購(gòu)的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時(shí),使游離的堿性物質(zhì)除去,再以流水沖凈。對(duì)容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉(zhuǎn)動(dòng)容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸,數(shù)分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。全自動(dòng)滅菌程序可快速完成高溫高壓滅菌流程。
干粉顆粒微生物培養(yǎng)基儲(chǔ)存條件:通常情況下,干粉培養(yǎng)基和顆粒培養(yǎng)基產(chǎn)品,在室溫干燥避光的儲(chǔ)存環(huán)境中,并注意密封存放,避免產(chǎn)品陽(yáng)光直射,室內(nèi)濕度與溫度太高,如不注意密封情況,顆粒粉末在會(huì)有結(jié)塊和受潮的現(xiàn)象,所以使用后一定要擰緊蓋子,注意防潮。關(guān)于儲(chǔ)存時(shí)長(zhǎng),只要嚴(yán)格按照培養(yǎng)基廠家的標(biāo)簽要求存放,未開封的培養(yǎng)基可保存兩至三年。我們平常使用時(shí),干粉沒必要放在冰箱里,但如果在制備當(dāng)天打開培養(yǎng)基后沒有用完,建議將其存放在冰箱中,減少受潮問(wèn)題但不要放置太多天。總之沒有開封的干粉、顆粒培養(yǎng)基存放在陰涼干燥處即可。緊急停止鍵卡滯可用酒精清潔觸點(diǎn)。中國(guó)臺(tái)灣實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽.廣西Systec培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過(guò)容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)較好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。廣西Systec培養(yǎng)基制備器