無血清凍存液注意事項:1、請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存。2、凍存液加入細胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細胞,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套。無血清凍存液特性:1.不含動物成分。2.不需回溫,完全即用型。3.適合各種動物細胞。4.適合無血清培養(yǎng)細胞與含血清培養(yǎng)細胞。5.復(fù)蘇細胞存活率高。無血清凍存液用途:1、無血清細胞凍存液用于免疫細胞及干細胞的存儲。2、細胞保藏中心,無血清細胞凍存液用于細胞株的長期保存。3、科研高校,無血清細胞凍存液用于細胞株凍存。4、無血清細胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫細胞樣本保存。無血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件:1、置于2~8℃避光保存,有效期為1年;置于-20℃保存,有效期為3年;2、本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超過保質(zhì)期,必須放棄使用;3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量,請避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。無血清細胞凍存液:一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞。無血清細胞凍存液推薦廠家
無血清細胞凍存液:產(chǎn)品優(yōu)勢:1.化學(xué)成分明確,無任何外源蛋白和血清,適用于各類動物細胞株凍存。2.無需程序降溫,細胞復(fù)蘇率90%以上。3.凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年。4.即用型產(chǎn)品,4℃可穩(wěn)定保存。細胞凍存:1.收集融合率>90%的對數(shù)期的貼壁細胞或者懸浮細胞于離心管中。2.1000rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清液,收集細胞沉淀。3.加入適量細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為1x106~1x107cells/mL。頭輕柔吹打混勻,Z成細胞懸液。4.將離心管中的細胞懸液分裝與細胞凍存管中,每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細胞直接凍存于-80℃冰箱中,可穩(wěn)定凍存數(shù)年。6.如若長期保存,可在次日轉(zhuǎn)移至液氮中。南京正規(guī)無血清細胞凍存液進貨價無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染。
冷凍速率:冷凍速率是指降溫的速度,直接關(guān)系到冷凍效果。冷凍速度不同,細胞內(nèi)水分向外流動的情況也不相同,不同的冷凍速度既然能使細胞內(nèi)發(fā)生不同的生理變化,也可以對細胞產(chǎn)生不同的損傷。超快速玻璃化冷凍對細胞存活來說是較為理想的冷凍方法。細胞內(nèi)外呈玻璃化凝固,無冰晶形成或形成很小的冰晶,對細胞膜和細胞器不致造成損傷,細胞也不會在高濃度的溶質(zhì)中長時間暴露而受損。不同細胞的較適冷凍速率不同。小鼠骨髓干細胞、酵母、人紅細胞的較適冷凍速率分別為1.6℃/min、7℃/min和200℃/min。細胞與細胞之間的較適冷凍速率可在1.6℃~300℃/min,故對一種細胞進行冷凍保存之前,首先需要測定其較適冷凍速率,以保證獲得較高的冷凍存活率。
細胞凍存:細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦離開活的開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。原理:細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以較大限度的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。無血清細胞凍存液使用方法:取相當(dāng)于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中。
細胞凍存注意事項:1、細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。2、復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。3、加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度無血清細胞凍存液的優(yōu)勢:即用型,無需現(xiàn)配,直接將細胞懸浮于凍存液中即可。貴陽正規(guī)無血清細胞凍存液廠家推薦
清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。無血清細胞凍存液推薦廠家
無血清快速細胞凍存液,是一種新型的快速凍存細胞的保護液,可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動物來源的血清成分,能夠有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求。無血清凍存液使用方法:1、收集懸浮細胞或貼壁細胞,離心去除上清培養(yǎng)液。2、加入適量的細胞凍存液,重懸細胞,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。無血清細胞凍存液推薦廠家