目前主要由三種髓鞘蛋白(或蛋白多肽)用于誘發(fā)EAE模型的研究:髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG),髓鞘堿性蛋白(MBP)和髓鞘蛋白脂質(zhì)蛋白(PLP)※MBP是**早用來EAE研究的髓鞘抗原,多以誘發(fā)急性EAE(AcuteEAE)模型。※MOG是目前常用建立EAE模型的髓鞘抗原,多以誘發(fā)慢性EAE(ChronicEAE)模型※PLP也是常用建立EAE模型的髓鞘抗原,模型呈現(xiàn)緩解-復(fù)發(fā)的特點(diǎn),多用來建立復(fù)發(fā)-緩解型(RelapseremittingEAERR-EAE)模型。以上三種是常見的誘導(dǎo)eae模型的蛋白。MS的每個(gè)方面都需要在EAE模型中進(jìn)行單獨(dú)研究,增加了數(shù)據(jù)分析的難度。四川專業(yè)的eae模型怎么造模
通常不同品種動(dòng)物對同一抗原的敏感性不同、不同抗原的抗原性也不同,并且不同來源的同一抗原的活性也有明顯差異。一般情況下,抗原性強(qiáng)弱依次為豚鼠脊髓>大鼠脊髓>牛脊髓,脊髓組織>腦組織,豚鼠MBP>牛MBP。蛋白或多肽單體不但結(jié)構(gòu)明確,而且可以精確定量,因此利于進(jìn)行EAE發(fā)病機(jī)制研究,但不易獲得。脊髓勻漿和腦組織勻漿兩種抗原均含有多種抗原表位,且易于獲得,適用于多種動(dòng)物,但其成分復(fù)雜,不易精確定量,這給某些特殊研究造成不便。誘導(dǎo)鼠類產(chǎn)生EAE模型的異種抗原,以新鮮豚鼠脊髓制備的抗原佐劑乳化物為比較好。在一定范圍內(nèi)抗原的量和EAE的發(fā)病率及發(fā)病程度有相關(guān)性,注射抗原佐劑乳化物的劑量越大,EAE的發(fā)病率越高。抗原的劑量可因動(dòng)物的品系、抗原種類、免疫方法、研究目的等的不同而有很大變化。另外,抗原的物理狀態(tài)也很重要,高分散度的抗原易于被吞噬和遞呈,進(jìn)而較高效率地***免疫系統(tǒng)。四川小鼠eae模型造模方法eae模型還可以研究炎癥和髓鞘再生的解決反調(diào)節(jié)機(jī)制。
科學(xué)家們可以通過精心調(diào)控EAE動(dòng)物模型的免疫反應(yīng),深入研究免疫療法在多發(fā)性硬化癥(MS)療愈中的潛在應(yīng)用。在EAE動(dòng)物模型中,科學(xué)家們能夠模擬MS患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)的異常反應(yīng),并通過一系列實(shí)驗(yàn)手段,精細(xì)地調(diào)控免疫細(xì)胞的活性、數(shù)量和功能。通過觀察調(diào)控免疫反應(yīng)后EAE動(dòng)物模型的病情變化,科學(xué)家們能夠評估不同免疫療法對MS的療愈效果,并探索其背后的作用機(jī)制。這一研究不僅有助于揭示MS的發(fā)病機(jī)制,還為開發(fā)新的免疫療法提供了重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。因此,通過調(diào)控EAE動(dòng)物模型的免疫反應(yīng)來研究免疫療法在MS療愈中的應(yīng)用,對于推動(dòng)MS的療愈進(jìn)展具有重要意義。
獲取實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,并檢測其特性。方法取8周齡,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至發(fā)病高峰期(第15天)時(shí)以PBS灌注后取小鼠后腦和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通過100μm濾網(wǎng)濾過,而后采用Percoll密度梯度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,進(jìn)一步利用CD11b與CD45抗體染色,通過流式細(xì)胞儀分選CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)細(xì)胞,即分別得到相對活化和靜息的小膠質(zhì)細(xì)胞,***對流式分選獲取的小膠質(zhì)細(xì)胞行qPCR檢測。結(jié)果通過形態(tài)比較,獲得了高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞。FIZZ-1基因行qPCR檢測,結(jié)果顯示在EAE急性期M2型小膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多,符合文獻(xiàn)報(bào)道。結(jié)論該方法能從EAE小鼠體內(nèi)分離獲取高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞,可用于相關(guān)目的基因后續(xù)檢測。EAE動(dòng)物模型是研究MS病理過程、發(fā)病機(jī)制的重要途經(jīng),在臨床神經(jīng)免疫學(xué)的研究中具有重要意義。
從鳥類到哺乳類的多種動(dòng)物如雞、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、羊、犬、猴等均可成功誘發(fā)EAE,但不同種屬或同一種屬不同品系動(dòng)物的敏感性有很大差異。對EAE敏感的動(dòng)物有Lewis、DA大鼠,PL/J、SJL/J小鼠,Hartley、Strain13豚鼠。雖然豚鼠對誘發(fā)EAE相當(dāng)敏感,但其品系復(fù)雜,有關(guān)試劑缺乏,一般不常用作實(shí)驗(yàn)對象。相比之下大鼠及小鼠的背景知識及相關(guān)試劑則較為普遍,遺傳學(xué)、免疫學(xué)等方面的研究也較深入,且其EAE在臨床、病理、免疫及生化改變等方面都與人類脫髓鞘疾病較為相似,因此應(yīng)用比較為普遍??梢栽诤铩⒋笫?、小鼠等動(dòng)物制備EAE模型。甘肅哪里有eae模型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包
MBP68-86可直接誘導(dǎo)Lewis大鼠形成EAE模型,無需任何佐劑[。四川專業(yè)的eae模型怎么造模
EAE模型是自身免疫性腦脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis)的動(dòng)物模型,它是多發(fā)性硬化癥(MS)的常用研究工具。這個(gè)模型通過引起小鼠或大鼠免疫系統(tǒng)攻擊其自身神經(jīng)組織而導(dǎo)致神經(jīng)損傷和癥狀,從而研究MS的病理生理學(xué)、免疫學(xué)和***方法。模型的建立需要給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射特定蛋白結(jié)構(gòu),如脊髓蛋白、腦蛋白等,以激發(fā)其免疫系統(tǒng)并模擬MS的癥狀。該模型的應(yīng)用范圍普遍,包括探究疾病***藥物的有效性、研究免疫系統(tǒng)攻擊神經(jīng)組織的機(jī)制等。四川專業(yè)的eae模型怎么造模