東北生物指示劑合規(guī)性測(cè)試

環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù)注意事項(xiàng) 1、切勿將生物指示劑進(jìn)行紫外照射消毒，建議對(duì)初級(jí)包裝進(jìn)行擦拭。 2、環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù)，建議使用含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水進(jìn)行稀釋。 3、吸取含紙質(zhì)載體的菌液時(shí)，避免纖維堵槍頭，導(dǎo)致移液不準(zhǔn)確。 4、建議以單片（支）生物指示劑的形式進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保每片（支）生物指示劑計(jì)數(shù)結(jié)果均符合要求。 5、建議使用玻璃珠（4mm-6mm）對(duì)紙質(zhì)載體進(jìn)行打散處理。 6、芽孢計(jì)數(shù)過程中必須進(jìn)行熱激活處理：溫度80℃-85℃，時(shí)間10min。滅菌記錄被開不符合項(xiàng)？可追溯電子報(bào)告即刻生成。東北生物指示劑合規(guī)性測(cè)試

生物指示劑的定義與作用及法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)要求 定義：生物指示劑（Biological Indicators, BIs）是一種含有特定微生物（如芽孢）的標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品，用于驗(yàn)證滅菌過程的效力。其關(guān)鍵是通過監(jiān)測(cè)滅菌后微生物的存活情況，評(píng)估滅菌設(shè)備或工藝是否達(dá)到無菌保證水平（SAL，通常為10??）。 作用： 驗(yàn)證滅菌設(shè)備的性能（如溫度、壓力、氣體濃度等）。 確認(rèn)滅菌工藝的有效性（如穿透性、均勻性） 定期監(jiān)控滅菌程序的穩(wěn)定性（如再驗(yàn)證）。 法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)要求 生物指示劑的生產(chǎn)和使用需符合以下國際及國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)： ISO 11138系列：規(guī)定生物指示劑的菌種選擇、芽孢含量、抗力性能等要求。 GB 18281（中國標(biāo)準(zhǔn)）：對(duì)應(yīng)ISO 11138，明確濕熱、干熱、環(huán)氧乙烷等滅菌方式對(duì)應(yīng)的生物指示劑技術(shù)規(guī)范。 GMP/GLP：要求制藥企業(yè)和實(shí)驗(yàn)室使用標(biāo)準(zhǔn)化生物指示劑，確保滅菌驗(yàn)證的可追溯性和數(shù)據(jù)可靠性。 USP/EP/JP：各國藥典對(duì)生物指示劑的保存條件、培養(yǎng)方法和結(jié)果判定提出具體要求。 泰林生物提供滿足法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)要求的生物指示劑，包括：汽化過氧化氫、壓力蒸汽、環(huán)氧乙烷、懸液式濕熱、干熱滅菌和氣體滅菌生物指示劑。空間滅菌生物指示劑芽孢泰林生物指示劑的使用簡(jiǎn)便，適合各種規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)環(huán)境。

過氧化氫滅菌生物指示劑的芽孢計(jì)數(shù)方法 過氧化氫滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù)—操作方法?隨機(jī)抽取需檢驗(yàn)批次生物指示劑 4片（支）與相關(guān)物品一并放入安全柜中，用酒精棉擦拭外表面，通風(fēng)15min以上，后續(xù)操作如下：特別提醒：不可將指示劑進(jìn)行紫外照射，否則會(huì)造成計(jì)數(shù)結(jié)果偏低?。?！ 01芽孢洗脫 在生物安全柜中，取出生物指示劑載體，分別放置于無菌試管中，向試管中加入 10 mL無菌純化水，于渦旋混勻儀上震蕩2min，轉(zhuǎn)移至超聲波清洗機(jī)中，設(shè)置頻率為40KHz，處理15min，將該試管記為10-1。 特別提醒：不要將多片載體放置到一個(gè)容器中進(jìn)行洗脫，載體相互堆疊可能影響洗脫效果，造成計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。

環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計(jì)數(shù)方法之芽孢洗脫后梯度稀釋和制備計(jì)數(shù)平皿 將該試管轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，于旋渦混勻儀上旋渦30s，用移液槍吸取1mL芽孢懸液，加入到另一根含有9mL含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水的試管中，記為10-2，按照該方法依次稀釋至10-3、10-4（稀釋級(jí)別按制造商提供的芽孢數(shù)量而定）。 取芽孢數(shù)在30cfu/mL-300cfu/mL的稀釋級(jí)別的試管（10-4）震蕩30s，每支稀釋管平行制備2個(gè)平皿，每皿加1mL菌懸液，注入15mL-20mL溫度不超過45℃融化的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）。等待瓊脂凝固后，倒置于30℃-35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h-72h后計(jì)數(shù)。泰林生物指示劑的Tyvek?特衛(wèi)強(qiáng)透析材料，滿足過氧化氫穿透要求。

過氧化氫滅菌生物指示劑的質(zhì)量波動(dòng)控制 過氧化氫滅菌驗(yàn)證過程中，滅菌過程無異常，但是個(gè)別點(diǎn)位的生物指示劑呈陽性，是什么原因造成的呢? 美國注射劑協(xié)會(huì)(Parenteral Drug Association，PDA)第51號(hào)技術(shù)報(bào)告《氣體和汽相除污工藝生物指示劑:質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、生產(chǎn)、控制和使用》[將由于生物指示劑質(zhì)量波動(dòng)或其他未知因素導(dǎo)致難以殺滅的指示劑稱為"Rogue Bls”，即“流氓生物指示劑”。制造商可以通過提高工藝水平來避免這一現(xiàn)象的發(fā)生。下面主要針對(duì)初級(jí)包裝、載體、芽孢分布等因素對(duì)生物指示劑質(zhì)量波動(dòng)的影響，進(jìn)行“流氓生物指示劑“成因和控制的分析。48小時(shí)顯色技術(shù)！肉眼可見變色培養(yǎng)基，快速判定滅菌成敗?？臻g滅菌生物指示劑芽孢

蒸汽/EO滅菌后如何快速驗(yàn)證？泰林生物指示劑快速出結(jié)果！東北生物指示劑合規(guī)性測(cè)試

生物指示劑質(zhì)量控制體系：關(guān)鍵環(huán)節(jié)、標(biāo)準(zhǔn)方法與實(shí)施策略 生物指示劑的質(zhì)量控制是確保滅菌驗(yàn)證結(jié)果可靠的重要保障。以下從原材料、生產(chǎn)過程、成品檢測(cè)到運(yùn)輸儲(chǔ)存的全鏈條質(zhì)量控制體系，結(jié)合國際標(biāo)準(zhǔn)與行業(yè)實(shí)踐，系統(tǒng)闡述關(guān)鍵控制點(diǎn)及實(shí)施方法。 質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié) 菌種管理 標(biāo)準(zhǔn)菌株溯源：必須使用ATCC或等效保藏中心的菌株（如嗜熱脂肪地芽孢桿菌ATCC 7953），并提供菌種鑒定報(bào)告（16S rRNA測(cè)序）。 傳代控制：限定傳代次數(shù)（通?！?代），防止遺傳漂變導(dǎo)致抗力下降。 芽孢制備與純化 芽孢形成率：通過顯微鏡計(jì)數(shù)（Malassez計(jì)數(shù)板）確認(rèn)≥90%為成熟芽孢。 雜質(zhì)去除：多次離心清洗去除營養(yǎng)細(xì)胞碎片（殘留營養(yǎng)細(xì)胞需＜1%）。 載體與包裝材料驗(yàn)證 穿透性測(cè)試：驗(yàn)證載體（如紙片、安瓿瓶）對(duì)滅菌介質(zhì)的通透性（如Tyvek?對(duì)環(huán)氧乙烷的滲透率需≥90%）。 阻菌性：按ISO 11607測(cè)試包裝材料的微生物屏障性能。東北生物指示劑合規(guī)性測(cè)試