熒光素二乙酸

來源: 發(fā)布時間:2022-06-14

    2)按10μL/g體重的濃度向每支小鼠注射相應量的15mg/mL熒光素溶液;3)腹腔注射10-15min后進行成像分析。(對每只動物模型做熒光素動力學研究以確定峰值信號獲取時間)Firefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素分子式:C11H8N2O3S2分子量:g/mol外觀:白色至淺黃色粉末溶解:,形成近乎無色至淺黃色的清夜保存:-15°C避光應用:1)活細胞、組織或生物體內luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內/體外表達的成像分析;2)***用于報告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,可溶于甲醇和DMSO;后者易溶于水或緩沖液中,使用方便,溶劑d0926aa8-0148-40da-80fa-f65性,特別適合體內實驗。配成溶液后的這三種產品,在絕大多數(shù)的應用上都沒有實質性的差別。相關列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二。D-熒光素鉀鹽檢測的安全性如何保障?熒光素二乙酸

    通過開發(fā)新的方法來改變螢火蟲螢光素酶檢測的信號動力學,例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進行檢測。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡化了樣品處理,并實現(xiàn)了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法。ATP是細胞健康的重要指標,這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力,尤其是在高通量應用中。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo?(2004年)和ADP-Glo?(2009年)酶檢測系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,還可以檢測底物(luciferin)濃度的變化。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產生反應的保護基團偶聯(lián),能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立,一種改進的luciferin面世,能更好地用于典型的報告基因檢測應用。這種新的底物——fluoroluciferin。泰州ATPD-熒光素鉀鹽使用說明D-熒光素鉀鹽如何選擇合作公司?

    常見的熒光素酶有兩種,分別是螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase,編碼基因是luc)和海腎熒光素酶(Renillaluciferase,編碼基因是Rluc),前者的底物是D-Luciferin,后者的底物是Coelenterazine。它們共同的作用原理是在ATP和熒光素酶的催化作用下,底物被氧化發(fā)光(不同底物光的顏色和波長不同),當?shù)孜镞^量時,產生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性。***成像技術(opticalinvivoimaging)目前主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術,生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物(D-Luciferin或Coelenterazine)化學發(fā)光的原理,將體外能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株植入動物體內,與后期注射入體內的底物發(fā)生反應,利用光學系統(tǒng)檢測光強度,間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位。這項技術已被廣泛應用于多個領域常用的有**或疾病動物模型的建立,并可用于病毒學研究、siRNA研究、干細胞研究、蛋白質相互作用研究等。以下主要介紹D-Luciferin(D熒光素)的分類:D-Luciferin:有三種,分別是D-Luciferin,SodiumSalt/D熒光素鈉鹽、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素。

    螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中**有代表性的是一種學名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內的螢光素酶,螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世。在生物化學和分子生物學的早期,這一現(xiàn)象被認為是發(fā)展生物分析的有力平臺。1991年,Promega發(fā)布了***代螢光素酶分析產品,并啟動了基于螢光素酶的進一步創(chuàng)新計劃,通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術。Promega螢光素酶技術發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,Promega***提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術的應用可能性。當時的人們認為,螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點,可能會對分子生物學家的研究產生重要的影響。幾個月后,***代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,使這項新技術正式并更***地為全球研究人員服務。隨后30年里,Promega不斷在螢光素酶實驗工具領域推陳出新,保持技術***的地位。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。[1]1991螢光素酶檢測系統(tǒng)。D-熒光素有時候也叫游離酸。

    更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyralis)。免疫熒光法免疫熒光法的基本原理是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結合部位,檢測出抗原或抗體。常用的熒光素有①異硫氰酸熒光素(fluoreceinisothiocyante,F(xiàn)ITC),為黃色、橙黃色或褐黃色結晶粉末,有兩種異構體,易溶于水和酒精等溶劑。分子量為389,更大吸收光譜為490~495,更大發(fā)射光譜為520~530urn,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,是更常用的標記抗體的熒光素。②四甲基異氰酸羅達明。熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。無錫熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽保質期

D-熒光素鉀鹽母液保存條件是-20℃避光。熒光素二乙酸

    LAR)Promega公司推出的第一種螢光素酶檢測試劑LuciferaseAssaySystem(LAR),為靈敏、非放射性的報告基因檢測拉開了序幕。LAR與螢火蟲螢光素酶(luc)報告基因一起,為研究人員開始了解基因表達調控因子提供了首要的工具。[1]1995Dual-Luciferase?報告基因檢測系統(tǒng)(DLR)DLR是第一種允許在單個樣本中依次檢測兩個報告基因的試劑。通過允許螢光素酶活性的內部歸一化,在提高報告基因檢測的可靠性方面取得了關鍵進展。此外,pGL3報告基因載體系列具有改良后的螢火蟲螢光素酶基因,luc+。這個改造一種報告基因以實現(xiàn)性能改進的例子后來被進一步應用到pGL4和luc2報告基因上,通過生物信息學和合成方法,實現(xiàn)了更大的改進。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲螢光素酶(Enliten)基礎上,改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶。UltraGlo?的開發(fā)是在各種檢測和儲藏條件下進行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測的關鍵。此后,通過開發(fā)新的方法來改變螢火蟲螢光素酶檢測的信號動力學,例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進行檢測。而“加樣-讀數(shù)”的形式簡化了樣品處理。熒光素二乙酸

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