按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名，以CAS號115144-35-9為準。2）注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3）如果要進行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材，在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。4）為避免反復凍融，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化，如有條件，可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。5）對于檢測靈敏度要求特別高的實驗，建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6）在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時，應使用無鈣鎂離子的DPBS，因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性，此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響，從而影響檢測。7）為了您的安全和健康。D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種？鎮(zhèn)江熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽濃度
Q：熒光素酶作為報告基因相比于熒光蛋白有哪些優(yōu)勢？Luciferase的靈敏度相比于GFP提高10-100倍以上，同時具有更寬的動態(tài)范圍，便于數(shù)值分析比較，不需要熒光顯微鏡，而且在***實驗中其熒光穿透性高于EGFP等熒光蛋白，同時由于沒有內(nèi)源活性、其本底信號很低。而GFP等熒光蛋白相比于熒光素酶的優(yōu)勢在于可以進行失蹤定位，并且其觀測不需裂解細胞，方便進行適時觀察。Q：海腎熒光素酶和螢火蟲熒光素酶相比，相對活性如何？在氧、鎂和ATP的存在下，螢火蟲熒光素酶作用于甲蟲熒光素，而來源于海洋腔腸（Renillareniformis)的熒光素酶在氧的存在下作用于海腎熒光素。雙報告基因技術（Dual-reporterassays）,結(jié)合了螢火蟲熒光素酶測試和海腎熒光素酶測試。Q：雙熒光素酶報告基因?qū)嶒炥D(zhuǎn)染效率很低而且復孔重復不出來是什么原因？轉(zhuǎn)染效率低的話可以從三個方面改善，首先要確保細胞狀態(tài)是好的，通常我們選出處于分裂期的細胞，另外陽性對照您可以選擇過表達的熒光蛋白質(zhì)粒，還有就是DNA的質(zhì)量尤為重要，更好是先酶切驗證。這個實驗檢測結(jié)果很靈敏，有一定差異是正常的，通常只要確保它在一個數(shù)量級之內(nèi)即可。如果差異超出這個范圍可以從兩方面改善，一是記住保持樣本的均一性。徐州專業(yè)做D-熒光素鉀鹽供應商D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。
或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融。2）用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細胞培養(yǎng)基。4）待圖像分析前，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min，然后進行圖像分析。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液，混勻。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用，或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射。4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2）注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3）如果要進行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材，在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。
在食品衛(wèi)生領域由于ATP生物發(fā)光技術無需培養(yǎng)過程，操作簡便、靈敏度高，數(shù)分鐘內(nèi)可得到結(jié)果，具有其它微生物檢測方法無法比擬的優(yōu)勢，是目前檢測微生物更快的方法。熒光素是更受歡迎的多功能生物熒光底物之一。在螢火蟲和幾種其它甲蟲中發(fā)現(xiàn)了螢火蟲熒光酶/熒光素。通過中間體dioxetanone介導作用，熒光素酶氧化ATPji活的熒光素。螢火蟲熒光素酶在ATP的輔助下氧化熒光素產(chǎn)生熒光。這個反應發(fā)生的幾秒內(nèi)在560nm處的化學熒光達到更高峰，當熒光素和ATP都超量存在的條件下，發(fā)射光與熒光素酶的活性成比例關系。螢火蟲熒光素酶很早以前就用于與抗體結(jié)合形成偶聯(lián)物，作為免疫分析中用熒光素作為底物進行檢測的標簽。與HRP和堿性磷酸酶相比，熒光素酶不耐化學修飾。這個酶的一個特殊的優(yōu)點是，除了高靈敏度外，在哺乳動物組織中內(nèi)源性熒光素酶的活性很低。熒光素酶另一個重要的作用是用于衛(wèi)生監(jiān)測。熒光素酶/熒光素系統(tǒng)可用于檢測污染，因為產(chǎn)生熒光所需的ATP存在于所以活ti生物中。這種類型的ATP生物熒光特性足以保證對食品表面的檢測，無論是在加工制作工程中設備的污染還是產(chǎn)品的污染都能檢出。D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物。南京D-熒光素鉀鹽測試公司哪家便宜。
熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內(nèi)。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低，因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱，其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶。在相應化學反應中，熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化，有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。沒有熒光素酶的情況下，螢光素與氧氣反應的速率非常慢，而鈣離子的存在常?？梢赃M一步加速反應（與肌肉收縮的情況相似）。[1]熒光生成反應通常分為以下兩步：螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸（luciferyladenylate）+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量，幾乎所有輸入反應的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈，只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光，剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。熒光素或熒光素酶不是特定的分子，而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱，雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。D-熒光素鉀鹽使用的是什么技術？連云港ATPD-熒光素鉀鹽發(fā)射波長
D-熒光素鉀鹽的激發(fā)波長是多長？鎮(zhèn)江熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽濃度
短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×)，混勻。立即使用，或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融。2）用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細胞培養(yǎng)基。作者：思存鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。高斯熒光素酶近年來，其他熒光素酶（例如高斯熒光素酶）的使用有所增加，因為這些報告基因較小，并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20kD的蛋白質(zhì)，可通過氧氣催化腔腸素氧化，產(chǎn)生光。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達后可有效地從哺乳動物細胞中分泌出來。Amplite?高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒（#AAT-12530）使用專有的發(fā)光配方來定量細胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當該試劑與高斯熒光素酶相互作用時，產(chǎn)sheng發(fā)光產(chǎn)物，該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光。Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒特點：提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件它們具有高靈敏度。鎮(zhèn)江熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽濃度
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