應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)學(xué)診斷:用于檢測病原體(如病毒、細(xì)菌、***等)的核酸,實現(xiàn)疾病的早期診斷,如核酸檢測;還可用于遺傳性疾病的基因診斷、**的分子診斷等。生物學(xué)研究:在基因表達(dá)分析、基因克隆、基因分型、DNA測序等基礎(chǔ)研究中發(fā)揮著重要作用,有助于深入了解基因的結(jié)構(gòu)和功能。法醫(yī)鑒定:通過對犯罪現(xiàn)場遺留的生物樣本(如血液、毛發(fā)、唾液等)進(jìn)行基因擴(kuò)增和分析,實現(xiàn)個體識別、親子鑒定等目的。農(nóng)業(yè)領(lǐng)域:可用于農(nóng)作物品種鑒定、轉(zhuǎn)基因作物檢測、植物病害檢測等,保障農(nóng)業(yè)生產(chǎn)安全和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量。傳統(tǒng) PCR 儀結(jié)構(gòu)相對簡單,價格較低,適合基礎(chǔ)實驗室的常規(guī)擴(kuò)增需求。32孔基因擴(kuò)增儀PCR儀哪個好
放入 PCR 儀:將配置好的反應(yīng)管放入基因擴(kuò)增儀 PCR 儀中,按照設(shè)定的程序進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。設(shè)置擴(kuò)增程序:一般包括預(yù)變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預(yù)變性步驟通常在 94℃-95℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-95℃,時間為 30-60 秒,使模板 DNA 雙鏈解鏈;退火溫度根據(jù)引物的 Tm 值確定,一般在 50℃-65℃之間,時間為 30-60 秒,使引物與模板 DNA 特異性結(jié)合;延伸溫度通常為 72℃,時間根據(jù)擴(kuò)增片段長度而定,一般為 1-2 分鐘 /kb;終延伸步驟在 72℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,確保所有擴(kuò)增產(chǎn)物延伸完整。循環(huán)次數(shù)一般為 30-40 次。南京普通基因擴(kuò)增儀PCR儀廠家直銷RePure-T三槽儀器采用了多重保護(hù)機制,有效防止過熱和其他潛在的故障。
儀器操作設(shè)置放置樣品板:將密封好的 96 孔板平穩(wěn)放入 qPCR 儀的樣品槽,確保孔位對齊,蓋緊儀器艙門。程序設(shè)置(通過儀器軟件):預(yù)變性:通常 95℃,30 秒 - 5 分鐘(熱啟動酶,使模板完全變性)。循環(huán)階段(變性→退火→延伸,同時采集熒光):變性:95℃,5-15 秒(使 DNA 解鏈)。退火 / 延伸:根據(jù)引物 Tm 值設(shè)置溫度(一般 55-65℃),20-30 秒(引物結(jié)合并延伸,熒光染料 / 探針在此階段發(fā)光)。循環(huán)次數(shù):通常 35-40 次(根據(jù)模板濃度調(diào)整)。溶解曲線(可選):用于驗證擴(kuò)增產(chǎn)物特異性,程序為 95℃ 15 秒→60℃ 1 分鐘→緩慢升溫至 95℃,同時連續(xù)采集熒光(觀察是否有單一峰,排除非特異性擴(kuò)增或引物二聚體)。熒光通道選擇:根據(jù)使用的熒光染料 / 探針類型選擇(如 SYBR GreenⅠ 對應(yīng) FAM 通道,TaqMan 探針根據(jù)標(biāo)記熒光選擇)。樣本信息錄入:在軟件中標(biāo)記樣品類型(如標(biāo)準(zhǔn)品、未知樣本、陰性對照、空白對照)及孔位對應(yīng)關(guān)系。
準(zhǔn)備試劑:準(zhǔn)備 PCR 反應(yīng)所需的各種試劑,包括 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、緩沖液、引物、Mg2?等。引物是決定 PCR 特異性的關(guān)鍵因素,需根據(jù)待檢測的轉(zhuǎn)基因成分的特定基因序列設(shè)計合成特異性引物。配置反應(yīng)液:按照一定的比例和順序,將各種試劑加入到無菌的 PCR 管中,配置成 PCR 反應(yīng)體系。一般反應(yīng)體系包括 10×PCR 緩沖液、2.5mmol/L dNTPs、25mmol/L MgCl?、10μmol/L 引物、5U/μL Taq DNA 聚合酶以及適量的模板 DNA,總體積通常為 20μL 或 50μL。柏恒RePure系列PCR儀具有優(yōu)越的擴(kuò)增效果,可靠地放大目標(biāo)DNA序列,保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
精細(xì)識別:PCR 技術(shù)可針對轉(zhuǎn)基因成分中特定的基因序列設(shè)計引物,如啟動子、終止子、目的基因等獨特的 DNA 碎片。這些引物能夠精細(xì)地與目標(biāo)基因序列結(jié)合,只對轉(zhuǎn)基因成分中的特定片段進(jìn)行擴(kuò)增,而不會對其他非目標(biāo)基因或生物體的 DNA 產(chǎn)生作用,從而實現(xiàn)對轉(zhuǎn)基因成分的精細(xì)檢測,有效區(qū)分轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因樣本。避免誤判:引物與目標(biāo)基因之間的特異性結(jié)合是基于堿基互補配對原則,具有高度的精確性。只要引物設(shè)計合理,就能準(zhǔn)確地識別并結(jié)合目標(biāo)轉(zhuǎn)基因序列,極大地降低了誤判的可能性,提高了檢測結(jié)果的可靠性。擴(kuò)增效果優(yōu)異的柏恒RePure系列PCR儀在PCR實驗中能夠準(zhǔn)確地放大目標(biāo)DNA片段,提供可靠的實驗結(jié)果。南京單槽基因擴(kuò)增儀PCR儀品牌排行
技術(shù)成熟,儀器穩(wěn)定性高,軟件操作便捷,兼容性強,廣泛應(yīng)用于科研和臨床領(lǐng)域。32孔基因擴(kuò)增儀PCR儀哪個好
96 孔 PCR 儀是一種基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)的儀器,通過 96 孔反應(yīng)板實現(xiàn)一次性處理 96 個樣本的基因擴(kuò)增,適用于高通量檢測場景。其設(shè)計**是通過精確控溫(加熱、冷卻、恒溫)實現(xiàn) DNA 的變性、退火、延伸循環(huán),廣泛應(yīng)用于科研、臨床、農(nóng)業(yè)、司法等領(lǐng)域。臨床與醫(yī)學(xué)檢測大規(guī)模病原體篩查應(yīng)用:、流感病毒、HPV 等傳染病的批量檢測(如醫(yī)院檢驗科、疾控中心)。案例:**期間,96 孔 PCR 儀配合自動化移液工作站,單日可完成數(shù)千份樣本的核酸提取與擴(kuò)增。遺傳疾病批量診斷應(yīng)用:同時檢測多個樣本的致病基因突變(如地中海貧血、脊髓性肌萎縮癥)。32孔基因擴(kuò)增儀PCR儀哪個好