精確含量測定:熒光定量 PCR 技術(shù)作為 PCR 的一種衍生方法,不僅能夠定性地判斷樣本中是否含有轉(zhuǎn)基因成分,還可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或相對定量法等手段,對轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行精確的定量分析,準(zhǔn)確測定樣本中轉(zhuǎn)基因成分的含量,為轉(zhuǎn)基因生物的監(jiān)管、標(biāo)識管理以及風(fēng)險評估等提供更詳細(xì)、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)支持。滿足法規(guī)要求:在食品安全管理和國際貿(mào)易中,許多法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)對轉(zhuǎn)基因成分的含量有明確的規(guī)定和限量要求。PCR 儀的定量分析功能能夠幫助檢測機(jī)構(gòu)和企業(yè)準(zhǔn)確判斷產(chǎn)品是否符合相關(guān)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn),確保產(chǎn)品的合規(guī)性。RePure-(D)B具備多重安全保護(hù)功能,如過溫保護(hù)、斷電記憶等,確保實(shí)驗(yàn)過程的安全?;驍U(kuò)增儀PCR儀型號
樣本采集:根據(jù)檢測對象不同,采集具有代表性的樣本。對于農(nóng)作物,需從不同部位如葉片、種子等采集適量樣品;對于加工食品,要考慮其成分復(fù)雜性,盡可能從多個部位或不同包裝中取樣,確保樣本能多方面反映被檢物的情況。樣本粉碎:采集后的樣本若為固體,需進(jìn)行粉碎處理,以便后續(xù)提取核酸??墒褂醚心x、粉碎機(jī)等設(shè)備將樣本粉碎成均勻的粉末狀,增加核酸提取的效率和均勻性。核酸提取:利用核酸提取試劑盒或相關(guān)提取方法,從粉碎的樣本中提取 DNA 或 RNA。常見的方法有 CTAB 法、SDS 法等,提取過程需嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行,以保證提取的核酸純度和完整性。核酸定量與質(zhì)量檢測:采用核酸定量儀,如分光光度計(jì)、熒光定量儀等,對提取的核酸進(jìn)行定量分析,確定其濃度和純度。同時,通過瓊脂糖凝膠電泳檢測核酸的完整性,確保核酸無降解,滿足后續(xù) PCR 檢測要求。南京熒光基因擴(kuò)增儀PCR儀經(jīng)銷商RePure-(D)B在同一次實(shí)驗(yàn)中測試多個不同溫度下的反應(yīng)效果,提高實(shí)驗(yàn)的成功率。
食品與食品安全:從源頭到餐桌的監(jiān)控:1. 微生物污染檢測場景:生鮮食品中沙門氏菌(invA 基因)、李斯特菌(hlyA 基因)的快速檢測,確保冷鏈?zhǔn)称钒踩?。技術(shù)價值:相比傳統(tǒng)培養(yǎng)法(需 48-72 小時),PCR 可在 4-6 小時內(nèi)完成檢測,適用于批量樣本應(yīng)急篩查(如食物中毒事件溯源)。2. 成分溯源與防偽場景:肉類制品中物種成分鑒定(如擴(kuò)增細(xì)胞色素 b 基因區(qū)分豬、牛、羊肉)、蜂蜜中植物源 DNA 檢測(區(qū)分槐花蜜與其他蜜種)。技術(shù)價值:防止摻假(如馬肉冒充牛肉),維護(hù)品牌信譽(yù)(如地理標(biāo)志產(chǎn)品的 DNA 指紋認(rèn)證)。
梯度 PCR 儀是一種具備多溫度梯度功能的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀器,其**優(yōu)勢在于可在同一反應(yīng)板上設(shè)置不同的溫度梯度(如橫向或縱向溫度梯度),允許用戶同時優(yōu)化多個退火溫度或其他循環(huán)參數(shù),***提升實(shí)驗(yàn)效率。這類儀器廣泛應(yīng)用于引物優(yōu)化、條件摸索和復(fù)雜擴(kuò)增反應(yīng),是科研與方法開發(fā)的關(guān)鍵工具。. 溫度梯度功能實(shí)現(xiàn)方式:通過半導(dǎo)體加熱模塊或金屬導(dǎo)熱板的分區(qū)控溫,在反應(yīng)板的不同孔位間形成線性溫度梯度(如 30℃~70℃,梯度范圍可達(dá) 40℃)。例:橫向梯度模式下,第 1 列孔為 50℃,第 12 列孔為 60℃,中間列按 0.5℃/ 列遞增,一次性測試 12 個不同退火溫度。優(yōu)勢:無需重復(fù)實(shí)驗(yàn)即可篩選比較好溫度,減少試劑消耗和時間成本。RePure-(D)B雙槽PCR是一款專業(yè)、高效的PCR儀器,具有雙槽設(shè)計(jì),可同時進(jìn)行兩組PCR反應(yīng),提高實(shí)驗(yàn)效率。
啟動反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運(yùn)行并實(shí)時顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后,通過軟件查看結(jié)果:定量結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達(dá)量(相對定量)。溶解曲線:若出現(xiàn)單一尖銳峰,說明擴(kuò)增特異性良好;若有雜峰,需排查引物或反應(yīng)條件問題。 污染防控(重點(diǎn))核酸污染:嚴(yán)格分區(qū)操作:將試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR 擴(kuò)增區(qū)分開,避免交叉污染。使用濾芯吸頭,每次加樣后更換吸頭,避免移液器接觸樣本或試劑瓶口。定期用 10% 次氯酸鈉或 DNA 酶清潔實(shí)驗(yàn)臺面、移液器和儀器樣品槽,紫外燈照射消毒操作區(qū)(30 分鐘以上)。試劑污染:試劑分裝保存(避免反復(fù)凍融),陰性對照(無模板)和空白對照(無菌水)必須設(shè)置,以監(jiān)測是否污染。RePure-(D)B梯度功能的應(yīng)用可有效減少實(shí)驗(yàn)中的試錯次數(shù),節(jié)省實(shí)驗(yàn)時間。江蘇QPCR基因擴(kuò)增儀PCR儀
RePure-(D)B可以在一次實(shí)驗(yàn)中嘗試多個溫度條件,快速評估合適的反應(yīng)條件,提高實(shí)驗(yàn)效果?;驍U(kuò)增儀PCR儀型號
反應(yīng)體系配制與加樣體系配制:按比例在離心管中混合各組分(先加非模板試劑,***加模板,避免污染),輕輕混勻(勿劇烈震蕩),短暫離心(1000-2000 rpm,10-20 秒)使液體沉底。示例(20μL 體系):qPCR Mix 10μL + 上游引物(10μM)0.8μL + 下游引物(10μM)0.8μL + 模板 2μL + 無菌水 6.4μL(探針法需額外加探針)。加樣:將配制好的體系逐一加入 96 孔板的對應(yīng)孔中,避免產(chǎn)生氣泡(若有氣泡,用吸頭刺破)。加樣后用封板膜密封(確保無褶皺、無漏液),短暫離心(500-1000 rpm,30 秒),使液體聚集在孔底,避免掛壁。基因擴(kuò)增儀PCR儀型號