PEI轉(zhuǎn)染試劑protocol

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-29

注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。更多PEI相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉(zhuǎn)染試劑不含動(dòng)物源成分。PEI轉(zhuǎn)染試劑protocol

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抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì),轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無(wú)縫轉(zhuǎn)化;以及提供藥物開(kāi)發(fā)和探索的抗體文庫(kù)定制和商業(yè)授權(quán)靈活的CHO工程細(xì)胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn),以此希望幫助國(guó)內(nèi)科研工作者快速地接觸世界范圍內(nèi)的技術(shù),分享研發(fā)工具進(jìn)步帶來(lái)的技術(shù)紅利,終為細(xì)胞、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫(yī)學(xué)行業(yè)等乃至整個(gè)生命科學(xué)行業(yè)賦能!更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!高性價(jià)比PEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)PEI轉(zhuǎn)染試劑用什么溶劑配制?

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PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn)。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限,被逼無(wú)奈只能放棄脂質(zhì)體2000,選擇PEI,以至于相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi),轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn):1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說(shuō)明書(shū),所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí),一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,順序不可錯(cuò),輕微混勻,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí),一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因?yàn)镻EI對(duì)細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當(dāng)提高。PS:事實(shí)證明,PEI是可行的,已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司!更多關(guān)于Kyfora Bio by Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!

產(chǎn)品簡(jiǎn)介Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級(jí)的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉(zhuǎn)染試劑)溶液,由PEIMAX配置而成,采用0.1umPES無(wú)菌過(guò)濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn)。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物,這些復(fù)合物很容易通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開(kāi)發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲(chóng)(SF9、SF21)等真核細(xì)胞系,可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒,所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。Transporter5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時(shí)間,加快項(xiàng)目進(jìn)度。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的性能檢測(cè),確保品質(zhì),在新藥研發(fā)過(guò)程中是一款快速、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。PEI轉(zhuǎn)染試劑有沒(méi)有毒性?

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產(chǎn)品特點(diǎn):PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級(jí)產(chǎn)品。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性;3.含更長(zhǎng)連續(xù)性乙烯亞胺片段,其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應(yīng)用領(lǐng)域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,以固體粉末形式提供,需用戶自行配置(詳情見(jiàn)使用方法)。更多關(guān)于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉(zhuǎn)染試劑的使用方法是怎樣的?四川高質(zhì)量PEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

PEI轉(zhuǎn)染試劑主要用于大規(guī)模的蛋白表達(dá)和病毒包裝。PEI轉(zhuǎn)染試劑protocol

材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲(chǔ)存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過(guò)濾,儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過(guò)濾(0.2μm濾膜)后儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細(xì)胞分盤:通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。歡迎咨詢上海曼博生物。PEI轉(zhuǎn)染試劑protocol