奉賢區(qū)標準探針現(xiàn)價

DNA探針根據(jù)其來源分為3種：一種來源于基因組中的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe），可以是基因的全序列，或者基因上的一段序列；另一種是從相應(yīng)的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針，稱為cDNA探針（cDNA probe）；此外，還可在體外人工合成20～50個堿基的與基因序列互補的DNA片段，稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。要得到一種特異性DNA探針，常常是比較煩瑣的。以細菌為例，細菌的基因組大小約為5×106堿基，約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針，通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法，即將細菌DNA切成小片段后（如用限制性內(nèi)切酶做不完全水解）分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫，然后用多種其他菌種的DNA探針來篩選，產(chǎn)生雜交信號的克隆被剔除，***剩下的不與任何其他細菌雜交的克隆則可能含有該細菌特異性DNA片段。不隨意安裝非正規(guī)商家應(yīng)用App、及各類廣告插件App,使用正規(guī)合法App是保護個人信息;奉賢區(qū)標準探針現(xiàn)價

（3）X射線強度測量系統(tǒng)。特征X射線，由B系統(tǒng)中的計數(shù)管接收，并轉(zhuǎn)換成電脈沖，通過脈沖高度分析儀、計數(shù)率計、定標器、電子電位計將其強度測量出來。（4）光學顯微鏡目測系統(tǒng)。用以準確選擇需要分析的區(qū)域，并作光學觀察。（5）背散射電子圖像系統(tǒng)。（6）吸收電子圖像系統(tǒng)。（7）特征X射線圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線晶體光學，主要應(yīng)用兩種方法：1）晶體衍射法（X射線光譜法）。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度，來衍射某種波長的X射線，通過讀出晶體不同的衍射角，求出X射線的波長，從而定出樣品所含的元素。浦東新區(qū)特制探針品牌電子探針又稱微區(qū)X射線光譜分析儀、X射線顯微分析儀。

3 面分析用于測定某種元素的面分布情況。方法是將X射線譜儀固定在所要測量的某元素特征X射線信號的位置上，電子束在樣品表面做光柵掃描，此時在熒光屏上便可看到該元素的面分布圖像。顯像管的亮度由試樣給出的X射線強度調(diào)制。圖像中的亮區(qū)表示這種元素的含量較高。定量分析定量分析時，先測得試樣中Y元素的特征X射線強度IY，再在同一條件下測出已知純元素Y的標準試樣特征X射線強度IO。然后兩者分別扣除背底和計數(shù)器死時間對所測值的影響，得到相應(yīng)的強度值IY和IO，兩者相除得到X射線強度之比KY= IY / IO。 直接將測得的強度比KY當作試樣中元素Y的重量濃度，其結(jié)果還有很大誤差，通常還需進行三種效應(yīng)的修正。即原子序數(shù)效應(yīng)的修正，吸收效應(yīng)修正，熒光效應(yīng)修正。經(jīng)過修正，誤差可控制在±2%以內(nèi)。

2）X射線能譜分析法。無須分析晶體，而直接將探測器接收的訊號加以放大，進行脈沖幅度分析，通過選擇不同的脈沖幅度來確定入射x射線的能量，從而區(qū)分不同的特征X射線。計算時應(yīng)用布拉格方程：nλ=2dsinθ。 [2]1、能進行微區(qū)分析?？煞治鰯?shù)個μm3內(nèi)元素的成分。2、能進行現(xiàn)場分析。無需把分析對象從樣品中取出，可直接對大塊試樣中的微小區(qū)域進行分析。把電子顯微鏡和電子探針結(jié)合，可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯(lián)系起來。3、分析范圍廣。Z>4其中，波譜：Be~U，能譜：Na~U。光學顯微鏡目測系統(tǒng)。用以準確選擇需要分析的區(qū)域，并作光學觀察。

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對探針加以標記，以便在結(jié)合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標記物的方法。非同位素標記的優(yōu)點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。**常用的探針標記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標記的互補核苷酸補入缺口，DNA聚合酶Ⅰ的這兩種活性的交替作用，使缺口不斷向3’的方向移動，同時DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標記的核苷酸所取代。利用特征波長來確定元素的儀器叫做波長色散譜儀（波譜儀），利用特征能量的就稱為能量色散譜儀（能譜儀）。虹口區(qū)質(zhì)量探針售價

X射線譜儀。測量各種元素產(chǎn)生的X射線波長和強度，并以此對微小體積中所含元素進行定性和定量分析。奉賢區(qū)標準探針現(xiàn)價

③末端標記法（又叫尾標）。利用末端轉(zhuǎn)移酶可進行“尾標”，尾標適用于寡核苷酸探針標記，寡核苷酸探針多用于核酸“點”突變的檢測，該探針可用核酸合成儀人工合成，克隆出的探針一般較長，特異性好，標記量大，雜交的檢出信號強。探針合成的注意事項①合成探針的長短，一般在20~50個核苷酸之間。合成過長成本高，且易出現(xiàn)聚合酶合成錯誤，雜交時間長，合成太短則特異性下降。②堿基組成G-C應(yīng)含40%~60%，一種堿基連續(xù)重復不超過4個，以免非特異性雜交產(chǎn)生。③探針自身序列內(nèi)應(yīng)無互補區(qū)域，以免產(chǎn)生“發(fā)夾”結(jié)構(gòu)，影響雜交?？傊?，一個好的探針**終要在實踐中才能加以確認。奉賢區(qū)標準探針現(xiàn)價

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