當前的技術(shù)主要有四種策略:1、基于組學實驗結(jié)合空間重建的計算策略。這種計算方法可以充分利用內(nèi)在基因表達模式或共表達的趨勢,從單個細胞的大量轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中重構(gòu)細胞間的環(huán)境。然而,這些推論方法在某些情況下*呈現(xiàn)空間趨勢或特定組織的總體布局。2、激光切割與NGS測序結(jié)合的策略?;贚CM的轉(zhuǎn)錄組學或基因組學成功地獲得了單個細胞的空間轉(zhuǎn)錄組,盡管其通量很低,但是在可以標記成千上萬個單個細胞位置的多路復用條形碼策略可行之前,將少量細胞的數(shù)據(jù)粗略地整合到構(gòu)成***的巨大背景中,可能具有一定價值。3、基于熒光物質(zhì)原位的轉(zhuǎn)錄組學?;趫D像的原位轉(zhuǎn)錄組學在很大程度上增加了可檢測區(qū)域,但也存在一些問題,例如幾種smFISH方法很難從包括信號干擾、轉(zhuǎn)錄本積累等復雜背景中提取單個細胞。4、基于寡核苷酸的空間條碼加上NGS測序。費用較高且無法在單個細胞中獲得轉(zhuǎn)錄組。10x Genomics公司宣布了新一代FFPE空間轉(zhuǎn)錄組商業(yè)化解決方案。天津歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組做什么
空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析的是根據(jù)每個芯片上每個 spot 的基因表達信息進行聚類,然后將 spot 根據(jù)坐標位置序列放回到組織的圖像上,同時可以對每個 gene 在組織上表達的空間位置進行定位。獲得測序數(shù)據(jù)后,首先利用 Space Ranger 軟件可以自動化的對圖像進行處理、數(shù)據(jù)比對和 Barcode 處理。另外一個軟件 Loupe Cell Browser 是一個適用于 Windows 和 MacOS 的桌面應用程序,它可以快速、輕松地可視化和分析10X Visium 數(shù)據(jù)。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破。宣傳空間轉(zhuǎn)錄組價格空間轉(zhuǎn)錄組是一項前沿技術(shù),涉及到很多細節(jié)方面的準備工作。
基于原位測序的空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)?;谠粶y序(ISS)的方法通過測序產(chǎn)生空間轉(zhuǎn)錄組信息,這種方法只依靠連接酶連接兩段DNA—一段已知序列的引物和一個探針與模板匹配,不匹配的探針就會被洗掉。2013年開發(fā)的ISS中,每個探針使用一個查詢堿基來測序基因條形碼。FISSEQ和后來的EXeq使用了SOLiD,每個探針使用兩個查詢堿基來測序環(huán)化和RCA擴增的cDNAs。在STARmap中,基因條形碼由SEDAL測序,其中還使用了兩個類似固體的查詢堿基來避免錯誤。BARseq還用基因條形碼放大了RCA探針?;贗SS技術(shù)的優(yōu)勢包括:單細胞分辨率、亞細胞轉(zhuǎn)錄物定位和可應用于更大的組織區(qū)域。缺點是:檢測效率較低。
什么是空間轉(zhuǎn)錄組?空間轉(zhuǎn)錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數(shù)據(jù)的技術(shù),從而解析單個組織切片中的所有mRNA。空間條形碼逆轉(zhuǎn)錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,使得在mRNA樣品處理和后續(xù)測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。單細胞RNA測序或組織樣本RNA測序,均無法為研究人員提供精確的空間信息。通過空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)可獲取組織中具體的位置的轉(zhuǎn)錄信息,為研究和診斷提供有效數(shù)據(jù)支撐。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破。只聽名字就想嘗試,不清楚空間轉(zhuǎn)錄組的原理及通過該技術(shù)究竟能拿到什么結(jié)果。
早期空間轉(zhuǎn)錄組學的另一條發(fā)展路線是基因捕獲和增強子捕獲篩選,開發(fā)于二十世紀八十年代,當時 DNA 測序通量正在增加,動物基因組是新開放的前沿領(lǐng)域。果蠅和小鼠的篩選是在八十年代后期進行的,目的是觀察未靶向且通常未知的基因表達情況。隨著通量的增加,增強子和基因捕獲技術(shù)在九十年代成為空間轉(zhuǎn)錄組學的技術(shù),直到 WMISH 在九十年代后期興起。WMISH 技術(shù)的自動化程度較高,避免了對轉(zhuǎn)基因品系的依賴,同時由于在二十一世紀初獲得物種的參考基因組信息變得越來越便利,探針設(shè)計因此也更為方便。盡管前傳時代的空間技術(shù)被迅速棄用,但其思想和方法是當今時代空間轉(zhuǎn)錄組學發(fā)展的基礎(chǔ)。湖南歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組規(guī)格
在未來的5-10年里,空間轉(zhuǎn)錄組學妥妥的是技術(shù)熱點。天津歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組做什么
空間轉(zhuǎn)錄組的應用有哪些?一、構(gòu)建空間轉(zhuǎn)錄組圖譜:借助于空間分辨的單細胞轉(zhuǎn)錄組學,建立圖譜可能是在分子水平上研究生物體結(jié)構(gòu)的重要步驟。目前的多項研究通過單細胞轉(zhuǎn)錄組技術(shù)結(jié)合空間轉(zhuǎn)錄技術(shù),得到多個***的時空轉(zhuǎn)錄組圖譜(相關(guān)研究后續(xù)會在如下專輯更新)。二、描繪胚胎發(fā)育和空間藍圖:胚胎發(fā)育是一個復雜的過程,其中動態(tài)變化在生物分子水平上迅速發(fā)生。對這種微觀變化的時間和空間方面的分析都具有挑戰(zhàn)性。預期使用空間轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)可以表征胚胎發(fā)育的空間表達藍圖。天津歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組做什么
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