酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明,MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結合可以增強后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進而負向調(diào)控MdTRB1介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。酵母單雜交實驗步驟酵母文庫構建原理。福建酵母文庫應用
通過酵母雙雜篩選實驗,進一步研究AaWRKY9蛋白功能,結果篩選到了與AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通過Y2H、BiFC、CoIP等進行了驗證確認。JAZs是JA介導的植物相應中的負向調(diào)控因子,在毛狀體和老葉中高表達,在芽尖和嫩葉中表達量低。為確認AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促進青蒿素積累過程中的轉(zhuǎn)錄***功能,通過雙熒光素酶報告基因檢測實驗發(fā)現(xiàn),當AaWRKY9與AaJAZ9共表達時,其轉(zhuǎn)錄活性被抑制,而使用MeJA處理后,這種抑制作用被抵消,且AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性增強,反向驗證實驗結果一致。說明JA可以通過降解JAZ9,提高AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性,促進青蒿素生物合成。云南酵母文庫有什么用專業(yè)酵母文庫構建和篩選公司多年經(jīng)驗。
酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對照相比,擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低,而硝酸鹽處理可以進一步抑制其生長,外源施加GA可以回復其生長缺陷。在擬南芥中異源表達MdBT2可以明顯提高植株高度,而PAC處理則會抑制這種生長的促進作用。在擬南芥中異源表達MdRGL3a可以明顯抑制植株生長,而硝酸鹽處理和MdBT2過表達則會緩解這種生長抑制作用。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對植株生長的影響(圖A-D)。以上結果表明,BT蛋白通過DELLA蛋白調(diào)控植株生長,這一機制在不同的植物中具有保守性。
歐易酵母文庫助力小麥根長抑制分子機制研究,近日,中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學王翔副教授為共同通訊作者,在 Journal of Experimental Botany 雜志(IF: 6.992)在線發(fā)表了題為“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究論文,報道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長的分子機制。文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨特***。根系結構的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報道,但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。使用原裝酵母技術試劑盒、培養(yǎng)基,保證實驗質(zhì)量。實驗流程細致謹慎,實驗團隊經(jīng)驗豐富。
通過傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫。將獲得的陽性克隆,10個一組,挑選到1個96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個陽性克隆的96孔板。以其中陽性克隆mix為模板,進行PCR擴增,并將所有的PCR產(chǎn)物進行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物,進行打斷后構建二代測序文庫,通過NGS測序,獲得6G的陽性克隆數(shù)據(jù)。通過分析二代測序數(shù)據(jù),獲得陽性克隆基因信息(去冗余后獲得135個互作子,包含21個TFs,2個TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結合等蛋白,部分見表1)。挑選重要的候選基因進行一對一驗證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡進行比對分析。對DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達譜、啟動子中的順勢作用元件功能進行分析,并對DIPs進行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結果,構建針葉樹老化途徑的調(diào)控模型(圖4)。酵母文庫質(zhì)粒使用指南酵母菌的介紹 。廣東技術酵母文庫報價
酵母雙雜實驗過程中如何選擇核體系或者膜體系? 。福建酵母文庫應用
歐易生物酵母文庫技術發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號反應的阻遏物,通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來負向調(diào)節(jié)JA信號?;ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子、葉、花和果實中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,可充當抗氧化劑,幫助***活性氧和對**老,對人類健康具有重要價值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中,蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導的花青素和原花青素的生物合成,但其分子機制仍有待深入研究。福建酵母文庫應用
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