殺毒滅菌方式主要有三種類型:⑴高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數(shù)耐熱培養(yǎng)基。⑵煮沸滅菌法方式:此方法可用于含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基。⑶過濾除菌方式:過濾除菌,采用無菌技術(shù)定量添加培養(yǎng)基。血液和可以用無菌技術(shù)抽取并加入冷卻至約五十度的培養(yǎng)基中。當培養(yǎng)基中含有不耐熱物質(zhì)時可以使用此方法。培養(yǎng)基倒入平板:將滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。微生物培養(yǎng)基制備的溫度不能太高,否則培養(yǎng)皿內(nèi)蓋容易形成過多的冷凝水。通訊連接失敗檢查數(shù)據(jù)線接口氧化情況。瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基配制:配制用水,培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標準,水的電阻應為200萬歐姆,一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基:培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠低于6.8,則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清:培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。遼寧培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器一鍵選擇培養(yǎng)皿類型;整合數(shù)據(jù)庫,預設(shè)培養(yǎng)皿尺寸選擇程序!
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被較廣用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝中起重要作用,如SeO3、硒等。
培養(yǎng)基制備方法與注意事項:1、培養(yǎng)基配方選擇同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養(yǎng)基制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,好終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥椭朴涗涬S制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成份稱量培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,好好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。快速冷卻技術(shù)避免熱敏感成分降解,保護活性物質(zhì)。 設(shè)備兼容不同規(guī)格容器,滿足小試到中試生產(chǎn)需求。
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,避免有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。Z好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,Z后必須加以補足。設(shè)備運行噪音低于行業(yè)標準,優(yōu)化實驗室環(huán)境。 在環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域支持微生物檢測培養(yǎng)基快速制備。吉林自動攪拌培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基中的維生素、生長因子等易受高溫破壞,高效加熱縮短熱暴露時間,減少降解。瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器售后
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質(zhì)。提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器售后