尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測(cè)細(xì)菌是否具有尿素酶活性的微生物培養(yǎng)基。其特點(diǎn)主要包括:1.**成分**:尿素培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、氯化鈉、磷酸二氫鉀、尿素、葡萄糖、酚紅指示劑和瓊脂等。蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀作為緩沖劑;尿素作為底物檢測(cè)細(xì)菌是否具有尿素酶活性;酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.2±0.2(25℃),以保證微生物的生長(zhǎng)環(huán)境和酶活性的發(fā)揮。3.**尿素酶檢測(cè)**:某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時(shí)變色(通常為粉紅色),通過觀察顏色變化來判斷細(xì)菌是否具有尿素酶活性。4.**配制方法**:將除尿素和瓊脂以外的成分配好,并校正pH,加入瓊脂,加熱溶化并分裝。高壓滅菌后,冷至50~55℃,加入經(jīng)除菌過濾的尿素溶液,pH應(yīng)為7.2±0.1。分裝于滅菌試管內(nèi),放成斜面?zhèn)溆谩?.**應(yīng)用**:尿素培養(yǎng)基主要用于鑒定革蘭氏陰性菌中的尿素酶活性,如用于腸桿菌科細(xì)菌的鑒定,例如大腸埃希菌和奇異變形桿菌等細(xì)菌具有尿素酶活性,而鮑曼不動(dòng)桿菌則不具備尿素酶活性。沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基適用于多種微生物的培養(yǎng),尤其在酵母菌、霉菌及皮膚癬菌的分離和培養(yǎng)中表現(xiàn)出色。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)
CAS培養(yǎng)基,也稱為ChromeAzurolS(CAS)檢測(cè)培養(yǎng)基,主要用于檢測(cè)微生物是否產(chǎn)生鐵載體(siderophore)。鐵載體是一類能特異性結(jié)合鐵離子并供給微生物細(xì)胞的低分子量物質(zhì),對(duì)于微生物在缺鐵環(huán)境中的生長(zhǎng)至關(guān)重要。CAS培養(yǎng)基的特點(diǎn)主要包括:1.**成分**:CAS培養(yǎng)基包含鉻天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化銨(HDTMA)、鐵離子等成分,這些成分與微生物分泌的鐵載體反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化,從而可以判斷微生物是否產(chǎn)生鐵載體。此外,培養(yǎng)基中還包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸鎂、氯化鈣等,提供微生物生長(zhǎng)所需的碳源、氮源和其他生長(zhǎng)因子。2.**顏色變化**:當(dāng)微生物產(chǎn)生的鐵載體與CAS培養(yǎng)基中的復(fù)合物結(jié)合后,會(huì)奪走鐵離子,使培養(yǎng)基顏色由藍(lán)色變?yōu)殚冱S色,出現(xiàn)鐵載體分泌圈,這有助于判斷細(xì)菌是否產(chǎn)生鐵載體。3.**pH值**:CAS培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.8±0.1(25℃),以保證微生物的生長(zhǎng)和鐵載體的活性。4.**配制方法**:CAS培養(yǎng)基的配制方法相對(duì)復(fù)雜,但一些產(chǎn)品如Coolaber改良的CAS瓊脂培養(yǎng)基已經(jīng)進(jìn)行了改良,減少了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)間。該產(chǎn)品分為培養(yǎng)基基礎(chǔ)、已滅菌的緩沖劑和已滅菌的CAS檢測(cè)液三個(gè)部分,使用時(shí)只需將這些組分按說明混合即可。淡水魚類瓊脂培養(yǎng)基(FWA)培養(yǎng)基含有結(jié)晶紫和中性紅,可有效抑制革蘭氏陽性菌,同時(shí)促進(jìn)腸桿菌科細(xì)菌生長(zhǎng),菌落顏色分明,便于鑒別。
LG培養(yǎng)基的氮源具有出色的有效性,能高效地滿足微生物的氮需求。有機(jī)氮源如蛋白胨,富含多種氨基酸和多肽,這些氮源成分能夠被微生物迅速吸收和利用,為蛋白質(zhì)合成提供豐富的原料。微生物可以直接攝取蛋白胨中的氨基酸,用于構(gòu)建自身的蛋白質(zhì)分子,從而加快細(xì)胞的生長(zhǎng)和修復(fù)過程。同時(shí),無機(jī)氮源如銨鹽也發(fā)揮著重要作用,銨鹽在培養(yǎng)基中能夠以離子形式存在,易于被微生物細(xì)胞吸收。微生物通過特定的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將銨離子轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi),然后經(jīng)過一系列酶促反應(yīng),將銨離子整合到氨基酸和其他含氮化合物的合成途徑中,實(shí)現(xiàn)氮素的高效轉(zhuǎn)化和利用。這種有機(jī)和無機(jī)氮源的有效組合,確保了微生物在LG培養(yǎng)基中能夠獲得充足且適宜的氮源,維持其正常的生長(zhǎng)和代謝活動(dòng),對(duì)于提高微生物培養(yǎng)效率和質(zhì)量具有關(guān)鍵作用。
改良Frey氏液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)具有好的溶解性。其所含的各種成分在溶劑中展現(xiàn)出良好的溶解特性。無論是有機(jī)成分如蛋白胨、維生素等,還是無機(jī)成分如各種鹽類,都能迅速且均勻地溶解在培養(yǎng)基溶液中,形成穩(wěn)定的均一體系。這使得微生物在生長(zhǎng)過程中能夠充分接觸到各種營(yíng)養(yǎng)成分,不會(huì)因?yàn)槌煞值木植烤奂虺恋矶鴮?dǎo)致營(yíng)養(yǎng)缺乏或不均。例如,蛋白胨能夠快速分散在水中,將其中的氨基酸、多肽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)釋放出來,供微生物吸收利用;無機(jī)鹽類也能完全溶解,以離子形式存在于培養(yǎng)基中,便于微生物攝取。這種溶解性就像為微生物打造了一個(gè)“營(yíng)養(yǎng)均一池”,微生物在其中可以自由地在各個(gè)角落獲取所需營(yíng)養(yǎng),確保了微生物生長(zhǎng)環(huán)境的一致性和穩(wěn)定性,有利于微生物的均勻生長(zhǎng)和繁殖,為微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)和工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)提供了可靠的基礎(chǔ)保障。該培養(yǎng)基質(zhì)地均勻,透明度高,便于觀察菌落形態(tài),瓊脂凝固性好,穩(wěn)定性強(qiáng)適合長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果清晰可靠。
改良Frey氏液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)的維生素種類十分齊全。各類維生素在微生物的生長(zhǎng)過程中都扮演著不可或缺的角色。其中,B族維生素堪稱“先鋒隊(duì)”,維生素B1參與微生物的碳水化合物代謝,在酸的氧化脫羧反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用,為細(xì)胞提供能量代謝的重要中間產(chǎn)物;維生素B6深度介入氨基酸代謝,通過促進(jìn)轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)等,助力微生物合成自身所需的各種氨基酸,用于構(gòu)建蛋白質(zhì);維生素B12對(duì)微生物的核酸合成與細(xì)胞分裂有著不可替代的重要性,它參與甲基轉(zhuǎn)移反應(yīng)等關(guān)鍵步驟,保障遺傳物質(zhì)的復(fù)制與傳遞。其他維生素也在微生物的抗氧化、細(xì)胞膜合成等方面發(fā)揮著作用。這些維生素相互配合,如同為微生物開啟了一條“活力通道”,參與微生物的能量代謝、物質(zhì)合成以及細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖等眾多生理過程,使得微生物在培養(yǎng)基中能夠保持旺盛的生命力和高效的代謝活性。結(jié)晶紫中性培養(yǎng)基含有乳糖和葡萄糖,為大腸菌群等腸道菌提供豐富碳源,促進(jìn)其快速發(fā)酵產(chǎn)酸,助力高效檢測(cè)。M9低鹽培養(yǎng)基(5倍濃縮)
精氨酸配比準(zhǔn)確,優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境,顯著提高支原體培養(yǎng)成功率,即使低濃度樣本也能穩(wěn)定生長(zhǎng),確保數(shù)據(jù)可靠。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)
營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基呈現(xiàn)出良好的澄清度,這一特性在細(xì)菌培養(yǎng)過程中具有重要意義。清澈透明的培養(yǎng)基為觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)狀況提供了清晰的視野。在培養(yǎng)過程中,研究人員可以直觀地通過肉眼或借助簡(jiǎn)單的儀器觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài),如是否有菌膜形成、菌液是否渾濁以及是否有沉淀產(chǎn)生等。對(duì)于判斷細(xì)菌的生長(zhǎng)階段、繁殖速度以及是否存在污染等情況提供了便捷有效的依據(jù)。如果培養(yǎng)基本身渾濁不清,那么在觀察細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)將會(huì)受到極大干擾,難以準(zhǔn)確判斷細(xì)菌的真實(shí)狀態(tài)。而且,高澄清度的培養(yǎng)基也有利于對(duì)細(xì)菌進(jìn)行進(jìn)一步的分析檢測(cè),例如在進(jìn)行細(xì)菌的光學(xué)顯微鏡觀察或吸光度測(cè)定時(shí),能夠減少背景干擾,提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,從而為微生物學(xué)研究和相關(guān)實(shí)驗(yàn)提供可靠的觀察和分析平臺(tái)。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)