廣州無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹

細(xì)胞凍存概念：細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。反復(fù)吹吸混勻后，分裝于細(xì)胞凍存管中，每管500ul-1000ul。廣州無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹

無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品用途：1.無血清細(xì)胞凍存液可用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲(chǔ)存。2.無血清細(xì)胞凍存液可用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲(chǔ)。3.無血清細(xì)胞凍存液可用于其他類型哺乳動(dòng)物細(xì)胞的儲(chǔ)存。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品原理：無血清細(xì)胞凍存液，含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞，同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子，降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量，無血清細(xì)胞凍存液，為多種保護(hù)劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù)，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。珠海正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色：不含動(dòng)物源成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低。

細(xì)胞凍存液的作用是什么？滲透性冷凍保護(hù)劑：可以滲透到細(xì)胞內(nèi)，一般是一些小分子物質(zhì)，主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非滲透性冷凍保護(hù)劑：不能滲透到細(xì)胞內(nèi)，一般是些大分子物質(zhì)，主要包括聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及Hetastarch等。冷凍保護(hù)劑同溶液中的水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，同時(shí)冷凍保護(hù)劑可以通過在細(xì)胞內(nèi)外維持一定的摩爾濃度，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，使細(xì)胞免受溶質(zhì)的損傷。滲透性冷凍保護(hù)劑的保護(hù)機(jī)制是在細(xì)胞冷凍懸液完全凝固之前，滲透到細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護(hù)細(xì)胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷同時(shí)。細(xì)胞內(nèi)水分也不會(huì)過分外滲，避免了細(xì)胞過分脫水皺縮。

細(xì)胞凍存的基本原理：細(xì)胞代謝過程需要各種蛋白酶的參與，而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作，低溫貯藏的目的是通過較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài)，使細(xì)胞“不會(huì)老”，所以可以長(zhǎng)期保存。因?yàn)閮鋈谶^程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的，因此，需要開發(fā)出有效的技術(shù)來防止細(xì)胞死亡和損傷。低溫保護(hù)劑可保護(hù)細(xì)胞不受細(xì)胞內(nèi)冰凍影響，目前多采用DMSO，甘油，乙二醇和丙二醇等滲透型低溫保護(hù)劑。它們的作用機(jī)制包括：自由進(jìn)入細(xì)胞，取代水，使冰點(diǎn)下降，充當(dāng)鹽的二次溶劑，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2/℃ min。

冷凍速率：冷凍速率是指降溫的速度，直接關(guān)系到冷凍效果。冷凍速度不同，細(xì)胞內(nèi)水分向外流動(dòng)的情況也不相同，不同的冷凍速度既然能使細(xì)胞內(nèi)發(fā)生不同的生理變化，也可以對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生不同的損傷。超快速玻璃化冷凍對(duì)細(xì)胞存活來說是較為理想的冷凍方法。細(xì)胞內(nèi)外呈玻璃化凝固，無冰晶形成或形成很小的冰晶，對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞器不致造成損傷，細(xì)胞也不會(huì)在高濃度的溶質(zhì)中長(zhǎng)時(shí)間暴露而受損。不同細(xì)胞的較適冷凍速率不同。小鼠骨髓干細(xì)胞、酵母、人紅細(xì)胞的較適冷凍速率分別為1.6℃/min、7℃/min和200℃/min。細(xì)胞與細(xì)胞之間的較適冷凍速率可在1.6℃～300℃/min，故對(duì)一種細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存之前，首先需要測(cè)定其較適冷凍速率，以保證獲得較高的冷凍存活率。無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)：無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分。合肥無血清細(xì)胞凍存液廠家

無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)：即用型，無需現(xiàn)配，直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。廣州無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹

無血清細(xì)胞凍存液：凍存注意：開蓋之前，用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。以下說明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存。培養(yǎng)物應(yīng)該在適合傳代的時(shí)候進(jìn)行收集和凍存。每管所含有的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)來源于6孔板的1個(gè)培養(yǎng)孔。如果使用其他的培養(yǎng)器皿，請(qǐng)相應(yīng)的調(diào)整體積。1.在室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘。2.輕輕吸走上清液，注意不要擾動(dòng)細(xì)胞團(tuán)。3.用血清學(xué)吸管以1mL的TBD-698重懸細(xì)胞。在打散細(xì)胞團(tuán)時(shí)，盡量減少細(xì)胞聚集體分解。4.用2mL的血清學(xué)吸管將1mL的細(xì)胞聚集體轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的凍存管中。5.用以下方法凍存細(xì)胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法，每分鐘降低1度，隨后可以在-196°C液氮長(zhǎng)期保存。不推薦在-80°C長(zhǎng)期保存。逐步降溫法：-20°C保存2個(gè)小時(shí)，然后-80°C中保存2個(gè)小時(shí)，隨后可以在-196°C液氮中長(zhǎng)期保存。廣州無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹