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無血清快速細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色:1.高安全性,完全使用醫(yī)藥品等級原料進(jìn)行生產(chǎn),不含動(dòng)物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。2.細(xì)胞存活率高,無批次差異。3.完全凍存液配方,可直接使用,方便簡捷,可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程(省時(shí)、省力、省錢)。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)常規(guī)技術(shù)。寧波正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1、細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。2、復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。3、加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。蘇州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液服務(wù)電話隨著細(xì)胞治好以及細(xì)胞儲(chǔ)存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。
細(xì)胞凍存經(jīng)驗(yàn)談:選對凍存培養(yǎng)基才是王道:研究人員經(jīng)常需要冷凍細(xì)胞并保存,以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)或臨床使用?;具^程相當(dāng)簡單:慢慢冷凍細(xì)胞,將凍存管放入液氮中,并在需要時(shí)快速解凍。凍存培養(yǎng)基能支持細(xì)胞并防止冰晶形成。不過,Malfavon的體驗(yàn)告訴我們,使用不同的凍存培養(yǎng)基,結(jié)果那可是大不同。一些經(jīng)驗(yàn)老道的研究人員自己制備凍存培養(yǎng)基。不過,那些面對脆弱細(xì)胞(比如原代和多能細(xì)胞)的研究人員,則更喜歡購買標(biāo)準(zhǔn)化的商業(yè)產(chǎn)品。一些非常敏感的細(xì)胞系也許能從添加物中受益,以避免細(xì)胞在解凍時(shí)凋亡。
無血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng):1.將分裝好的細(xì)胞凍存管,直接置于-80度冰箱過夜保存,次日投入液氮中保存即可備注:1、凍存過程中,第2步在冰袋附近操作時(shí),低溫避免保護(hù)劑對細(xì)胞造成損傷。2、細(xì)胞凍存管一定要保證完全密封,否則在復(fù)蘇過程中有可能會(huì)炸(1)提前開啟水浴鍋,溫度調(diào)節(jié)到37(2)將凍存的細(xì)胞冷凍管從液氮中取出,迅速置于水浴鍋中融化,盡量1min融化,時(shí)間越短,對細(xì)胞影響越小。(3)將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻,(如細(xì)胞冷凍保存液為500ul,則加入到5ml新鮮培養(yǎng)基中,如細(xì)胞冷凍保存液位1ml,則加入10ml新鮮培養(yǎng)基中。)(4)混勻后立即離心,800轉(zhuǎn),3min即可離心結(jié)束后棄上清,加入預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液。(5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(二氧化碳濃度根據(jù)培養(yǎng)基要求決定,通常為5%【注意事項(xiàng)】細(xì)胞系凍存密度備注正常人成纖維細(xì)胞1~310cells/ml雜交瘤細(xì)胞1~310cells/ml某些hybridoma會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24小時(shí)后死去。無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢:因不含血清,批次間差異小。
無血清細(xì)胞凍存液復(fù)蘇細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。無血清細(xì)胞凍存液 產(chǎn)品原理:無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。寧波正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)
1000 rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清液,收集細(xì)胞沉淀。寧波正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)
使用方法:1)細(xì)胞超凈臺(tái)無菌環(huán)境,1.5mlEP管內(nèi)加入細(xì)胞混懸劑均勻混懸細(xì)胞,細(xì)胞終濃度為5×106個(gè)/ml,混懸液體積為200μl。細(xì)胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷,逐滴加入細(xì)胞凍存劑800μl,細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開啟程序性降溫,降溫速率為1℃/min,較后降溫至-80℃以下進(jìn)行凍存。將比較例1凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率與實(shí)施例5凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率進(jìn)行對比,具體結(jié)果如附圖1所示,可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細(xì)胞的復(fù)蘇率。其他實(shí)施例通過與比較例1進(jìn)行比較,也得到相同的試驗(yàn)結(jié)果。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細(xì)胞復(fù)蘇率,同時(shí)還可減少不同批次細(xì)胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體,細(xì)菌,朊細(xì)菌及其他細(xì)菌顆粒引發(fā)的污染。寧波正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)