外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:在一些病癥微環(huán)境中,一些病癥細(xì)胞來源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng);肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動TLR8,使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號通路活化,從而導(dǎo)致一些病癥的生長和轉(zhuǎn)移。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中,細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關(guān)報(bào)道稱,NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外,啟動的T細(xì)胞可以通過調(diào)控Fas信號通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn)。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一...
外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項(xiàng):1.對于待測樣品粘度過大時(shí),可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時(shí),可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標(biāo)志蛋白(CD63,CD9,CD...
研究表明被特定部位的細(xì)胞獲取的一些病癥外泌體可為一些病癥的轉(zhuǎn)移準(zhǔn)備轉(zhuǎn)移前微環(huán)境。用肺轉(zhuǎn)傾向的一些病癥細(xì)胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉(zhuǎn)傾向的一些病癥細(xì)胞重新定向。外泌體的蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)不同部位傾向性的一些病癥細(xì)胞來源的外泌體具有不同的整合素(integrin)表達(dá)譜,整合素α6β4和α6β1與肺轉(zhuǎn)有關(guān),而整合素αvβ5與肝轉(zhuǎn)有關(guān)。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細(xì)胞獲取,進(jìn)而分別降低了肺和肝的轉(zhuǎn)移。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)外泌體整合素被細(xì)胞獲取后啟動了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達(dá)。較后通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測一些病癥轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標(biāo)。獲得的外泌...
外泌體的提取分離:1、超速離心法(差速離心)。超離法是常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行(如圖所示),可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,但過程比較費(fèi)時(shí),且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),純度也受到質(zhì)疑;此外,重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。2、密度梯度離心。在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時(shí)。用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體,置于80℃儲存?zhèn)溆谩?..
將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉(zhuǎn)子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Millipore)濃縮至5mL,將濃縮液重新以10倍PBS稀釋后4℃超速離心100000×g(角轉(zhuǎn)子TYPE50.2)4h,收集離心管底部約1mL液體及極微量沉淀(來自2×107個(gè)細(xì)胞)以20mLPBS重懸即為胞外體,用0.22μm過濾膜除菌后凍存于-80℃?zhèn)溆谩#ㄔ摬襟E參考文獻(xiàn)“腫瘤細(xì)胞來源胞外體的分離鑒定與功能檢測”)優(yōu)點(diǎn)是:分離得到的外泌體...
1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。無法實(shí)現(xiàn)臨床的常規(guī)化應(yīng)用。昆明正規(guī)外泌體提取試劑銷售廠...
近年來,隨著外泌體研究的不斷深入,它的應(yīng)用已經(jīng)涉及一些病癥治病領(lǐng)域、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域;臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等。外泌體來源及內(nèi)含物。幾乎所有類型的細(xì)胞都可以分泌外泌體,同時(shí)外泌體也普遍存在于體液中,包括血液、眼淚、尿液、唾液、乳汁、腹水等。目前研究發(fā)現(xiàn)外泌體中富含核酸(microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA等)、蛋白、膽固醇等。外泌體的表面marker主要有CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27等。外泌體鑒定。目前對于外泌體的鑒定主要有四種方法:透射電子顯微鏡(TEM)、Nanosight、WesternBlot、流式...
外泌體與免疫系統(tǒng):不同的細(xì)胞來源的外泌體,包括免疫細(xì)胞(B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞)、病細(xì)胞、上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞,釋放出帶有載體的外泌體,可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細(xì)胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細(xì)胞可直接或間接地受到外泌體的影響,刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾病:外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細(xì)胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān);體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的外泌體具有保護(hù)心血管的作用。這些發(fā)現(xiàn)表明不同來源的外泌體可以通過傳遞miRNA,蛋白等物質(zhì)改變受體細(xì)胞的代謝...
聚乙二醇(PEG)可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集細(xì)菌,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以普遍普...
可以。為了能夠高效提取細(xì)胞培養(yǎng)上清中的外泌體,磁珠可重復(fù)使用5次(同一樣品)。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量。1mL體積以上細(xì)胞上清樣本建議進(jìn)行濃縮后再回收,提取時(shí)可進(jìn)行反復(fù)抽提,提高提取效率。用血液樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),需要根據(jù)磁珠狀況來判斷是否能重復(fù)利用;若磁珠發(fā)生聚集,利用渦旋儀也無法使磁珠分散,不建議繼續(xù)使用。詳情參考操作說明書。太好了,這樣實(shí)驗(yàn)成本瞬間就降下來了,那樣品純化所需的比較低量是?老師:使用旋轉(zhuǎn)器的需要500μL以上,使用離心管混合器的需要100μL。樣品量更少的情況下加TBS到所需比較低量后再使用ExosomeCapture固定化磁珠。同學(xué):電鏡分析需要外泌體的量是多少?外...
外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu),天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞(免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞),都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA,甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作...
所有的細(xì)胞都能分泌外泌體,但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性,這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,調(diào)控細(xì)胞生理活動。同時(shí),外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)一些病癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數(shù)據(jù)庫有哪些?lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA,包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。lExoCarta...
CD47是信號調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα,也稱為CD172a)的配體,CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號,從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖,增強(qiáng)胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細(xì)胞有一定毒性作用,但使用外泌體能夠較小化對細(xì)胞的毒性。研究人員發(fā)現(xiàn),CD47和病基因KRAS驅(qū)動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,并增強(qiáng)胰腺病細(xì)胞對外泌體的特異性。所以,外泌體的這種特性增強(qiáng)了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實(shí)驗(yàn)PDAC小鼠模型的總生存期。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的...
外泌體的形成與鑒定:首先,細(xì)胞膜內(nèi)陷形成一個(gè)杯狀結(jié)構(gòu),包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白,導(dǎo)致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome,ESE)的從頭形成,或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合;trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內(nèi)體(late-sortingendosomes,LSEs),較終形成MVBs(也稱為多囊內(nèi)小體)。MVBs是通過endosome限制膜向內(nèi)凹(即質(zhì)膜雙凹)形成的,這一過程導(dǎo)致MVBs含有多個(gè)ILVs。MVB可以與溶酶體或自噬體融合,較終降解或與質(zhì)膜融合釋放作為外泌體的ILVs。外泌體表面蛋白包括四聚...
用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng):1、選擇血清還是血漿?推薦大多數(shù)研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會產(chǎn)生大量外泌體,含量占血清中外泌體的50%以上,選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān),這可能是因?yàn)楦嗡嘏c引物和/或酶有競爭作用。除了克制PCR,肝素可以與外泌體結(jié)合,阻止細(xì)胞攝取外泌體。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達(dá)莫(CTAD),CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體。EDTA可能會干擾PCR反應(yīng)(盡管其程度小于肝素),但是還是優(yōu)于其他選擇。此外,有研究表明鈣螯合劑可在體外促進(jìn)外泌體與血小板的結(jié)合從而降低經(jīng)EDTA、或...
外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生長與侵襲。功能:當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。它普遍存在并分布于各種體液中,攜帶和傳遞重要的信號分子。廣州正規(guī)外泌體提取試劑價(jià)格外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來眾多文獻(xiàn)報(bào)道,肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋...
外泌體:該研究主要是做了牡蠣基因組測序,并揭示其應(yīng)激適應(yīng)和殼結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性。其中涉及,所鑒定的259種殼蛋白中的84%不是經(jīng)典分泌蛋白;它們可能是細(xì)胞的一部分或被外泌體沉積而來。259個(gè)殼蛋白中的61個(gè)與外泌體數(shù)據(jù)庫中的蛋白質(zhì)匹配,支持了外泌體的存在。在礦化前緣處觀察到含有方解石晶體的細(xì)胞和外泌體樣囊泡,盡管它們在殼形成中的重要性是有爭議的。這項(xiàng)研究為它們在殼內(nèi)的存在及其可能參與殼形成提供了分子證據(jù)。Hedgehog(Hh)蛋白的保守家族作為短距離和長距離分泌的形態(tài)發(fā)生素,在胚胎發(fā)育過程中控制組織構(gòu)型和分化。成熟的Hh攜帶疏水性棕櫚酸和對其細(xì)胞外擴(kuò)散至關(guān)重要的膽固醇修飾。如何高效地提取外泌體是實(shí)...
外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來,高通量質(zhì)譜分析被普遍地應(yīng)用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究,這為我們揭示了更多具有生物標(biāo)志物價(jià)值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術(shù)研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達(dá)不光能區(qū)分一些病癥與正常組織,同時(shí)也能區(qū)分各種肺病的組織亞型。此外,聯(lián)合應(yīng)用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達(dá)到0.74。Clark等采用納升液聯(lián)用技術(shù)(nano-ESI-LC-MS/MS)分析了來自正常支氣管上皮細(xì)胞系和兩個(gè)攜帶NSCLC細(xì)胞系的外泌體的蛋白表達(dá)譜,從中篩選出如細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘...
外泌體:該研究主要是做了牡蠣基因組測序,并揭示其應(yīng)激適應(yīng)和殼結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性。其中涉及,所鑒定的259種殼蛋白中的84%不是經(jīng)典分泌蛋白;它們可能是細(xì)胞的一部分或被外泌體沉積而來。259個(gè)殼蛋白中的61個(gè)與外泌體數(shù)據(jù)庫中的蛋白質(zhì)匹配,支持了外泌體的存在。在礦化前緣處觀察到含有方解石晶體的細(xì)胞和外泌體樣囊泡,盡管它們在殼形成中的重要性是有爭議的。這項(xiàng)研究為它們在殼內(nèi)的存在及其可能參與殼形成提供了分子證據(jù)。Hedgehog(Hh)蛋白的保守家族作為短距離和長距離分泌的形態(tài)發(fā)生素,在胚胎發(fā)育過程中控制組織構(gòu)型和分化。成熟的Hh攜帶疏水性棕櫚酸和對其細(xì)胞外擴(kuò)散至關(guān)重要的膽固醇修飾。外泌體的提取分離:超濾離...
外泌體在肺病治病中的作用:有研究發(fā)現(xiàn),使用外泌體運(yùn)載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細(xì)胞對PTX的吸收,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細(xì)胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。Aqil等在進(jìn)行裸鼠實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn),加載至外泌體中的雷公藤紅素(Exo-CEL)比普通的CEL有更強(qiáng)的抗一些病癥功效,且在小鼠中未發(fā)現(xiàn)明顯全身性或系統(tǒng)性毒性,由此可以證明,外泌體制劑可以有效增強(qiáng)CEL功效并降低與劑量有關(guān)的毒性。到目前為止,外泌體在肺病治病方面的研究主要集中于免疫壓制,有效的外泌體藥物遞送平臺的搭建以及外泌體相關(guān)的潛在治病靶點(diǎn)的探索。已有的研究表明外泌體在肺病治病領(lǐng)域有著廣闊的前景,期待外泌體在肺病治病...
Exosome,中文名外泌體,是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物。然而較近幾年,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,能作為信號分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對細(xì)胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,如免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),能很好的保護(hù)其包被的物質(zhì),且能靶向特定細(xì)胞或...
當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而啟動靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而啟動細(xì)胞內(nèi)的信號通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。外泌體提?。簶悠分写蠓肿硬荒?..
外泌體與免疫系統(tǒng):不同的細(xì)胞來源的外泌體,包括免疫細(xì)胞(B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞)、病細(xì)胞、上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞,釋放出帶有載體的外泌體,可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細(xì)胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細(xì)胞可直接或間接地受到外泌體的影響,刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾病:外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細(xì)胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān);體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的外泌體具有保護(hù)心血管的作用。外泌體(Exosome)是從體液(尿液、血液、唾液、腹水、胸腹水等)和細(xì)胞液中快...
這一特性已被應(yīng)用于開發(fā)心血管疾病,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測試。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,使外泌體懸浮于液體上層,外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn)。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein,ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機(jī)制表明,通過分析外泌體的組分,可以幫助識別其來源的細(xì)胞類型。外泌體提?。撼瑸V膜也可用于分離外泌體。長沙正規(guī)外泌體提取試劑...
由于這些核酸被囊膜包裹而被保護(hù),穩(wěn)定性高,不易降解,是一種用于一些病癥診斷和預(yù)后監(jiān)測的非常理想的新型生物標(biāo)記物一些疾病的早期診斷、用藥監(jiān)控、預(yù)后判斷。近年來,隨著人們對外泌體的研究和認(rèn)識加深,外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷、治病和監(jiān)測;如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵。外泌體(Exosome)是從體液(尿液、血液、唾液、腹水、胸腹水等)和細(xì)胞液中快速提取的,其是活細(xì)胞分泌到胞外的囊泡樣小體,含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA),在體內(nèi)細(xì)胞間物質(zhì)和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起到重要作用。獲得的...
外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項(xiàng):1.對于待測樣品粘度過大時(shí),可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時(shí),可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標(biāo)志蛋白(CD63,CD9,CD...
外泌體在肺病治病中的作用:有研究發(fā)現(xiàn),使用外泌體運(yùn)載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細(xì)胞對PTX的吸收,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細(xì)胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。Aqil等在進(jìn)行裸鼠實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn),加載至外泌體中的雷公藤紅素(Exo-CEL)比普通的CEL有更強(qiáng)的抗一些病癥功效,且在小鼠中未發(fā)現(xiàn)明顯全身性或系統(tǒng)性毒性,由此可以證明,外泌體制劑可以有效增強(qiáng)CEL功效并降低與劑量有關(guān)的毒性。到目前為止,外泌體在肺病治病方面的研究主要集中于免疫壓制,有效的外泌體藥物遞送平臺的搭建以及外泌體相關(guān)的潛在治病靶點(diǎn)的探索。已有的研究表明外泌體在肺病治病領(lǐng)域有著廣闊的前景,期待外泌體在肺病治病...
人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而細(xì)胞內(nèi)的信號通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。外泌體提?。好芏忍荻入x心。重慶正規(guī)外...
外泌體與肺病預(yù)后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表...
研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成,并初步闡明其分子機(jī)制。研究加深了對瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認(rèn)識,為開發(fā)瘧原蟲傳染來源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎(chǔ)。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對象,從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體,并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內(nèi)部,并與沒有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進(jìn)行對照。研究發(fā)現(xiàn),瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5...