根據(jù)細胞培養(yǎng)皿的大小加入適量細胞培養(yǎng)基后進行細胞常規(guī)培養(yǎng)。保存條件:4℃保存,有效期一年。若長不用可凍存于-20℃,有效期三年。
產(chǎn)品質(zhì)量:無血清細胞凍存液經(jīng)過嚴格的內(nèi),滲透壓,pH檢測,并經(jīng)過0.1um濾膜過濾,確保產(chǎn)品不含有細菌,支原體等污染。
注意事項:1.請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存,由于DMSO對細胞有一定的損傷,凍存細胞分裝后應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱,減少在室溫存放時間。如遇特殊情況,可先短暫放置于4℃并盡快轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。 細胞的凍存密度一般是多少?武漢bi 細胞凍存液價錢
紅細胞裂解液
產(chǎn)品說明:
紅細胞裂解液,為10X紅細胞裂解液,經(jīng)過優(yōu)化配方,用于從人或鼠等的血液或標本中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液。此溶液中主要有效成分為氯化銨。使在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞或其它有細胞核的細胞。本裂解液經(jīng)過無菌過濾,處理過的血液或細胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。
注意事項:
對于微量或少量的血液樣品,可以在一步中不進行離心棄上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液,并在冰上裂解4-5分鐘。對于鼠的血液,裂解4-5分鐘已經(jīng)足夠,對于人的外周血,宜延長裂解時間至10分鐘,但通常不宜超過15分鐘,并且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。后續(xù)步驟相同。 北京懸浮細胞凍存液加不加血清細胞凍存液的配方是什么?
細胞凍存的操作步驟是什么配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;離心1000rpm,5min;去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,
3、取待凍存的細胞用胰蛋白酶消化(方法見細胞的傳代部分)。用含血清的培養(yǎng)基將細胞沖洗下來,將細胞懸液吸到無菌離心管中,800r/min離心5min,棄上清,收集細胞沉淀。如果是懸浮生長的細胞,則可直接離心收集細胞。
4、在沉淀中加入適量凍存液制成細胞懸液,細胞濃度宜大,300萬/mL左右,一般一個中方瓶中的細胞濃縮至1mL,凍存液中為宜。
5、細胞懸液裝入凍存管中。用封口膜封裹瓶口,做好標記。
6、凍存管在4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃中30min,再轉(zhuǎn)入-70℃過夜,之后即可放入液氮中長久保存,注意進行登記。 細胞加凍存液沒有及時凍存會如何?
一些凍存液能夠通過降低某種溶液或者物質(zhì)的玻璃化溫度,使溶液在玻璃化的過程中仍保持一定的流動性。很多的凍存液也能通過氫鍵的形成來發(fā)揮作用(由于將水分子替物材料能夠保持原始的生理結(jié)構(gòu)和功能,這種保存方法主要用于低濕休眠。
2. 多種混合的凍存液含有更少的細胞毒性,通常會比單一的凍存液使用更加有效。帶有二甲基亞砜(DMSO),丙二醇(Propylene glycol),膠質(zhì)(Colloid)的甲酰胺(Formamide)是這么多年以來**為有效的人工制造的凍存液,同時凍存液的混合物也經(jīng)常被用于玻璃化。 細胞凍存液品牌有哪些?上海懸浮細胞凍存液比例注意事項
細胞凍存液配制主要成分.武漢bi 細胞凍存液價錢
冷凍細胞活化? 1、冷凍細胞之活化原則為快速解凍,以避免冰晶重新結(jié)晶而對細胞造成傷害,導致細胞之死亡。? 2、細胞活化后,約需數(shù)日,或繼代一至二代,其細胞生長或特性表現(xiàn)才會恢復正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質(zhì))。? 3、材料? 37℃恒溫水槽、新鮮培養(yǎng)基、無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶、液氮或干冰容器?4、步驟:? (1)操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。? (2)自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過程,此時蓋子易松掉。?(3)將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。?武漢bi 細胞凍存液價錢
上海儒安生物科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。公司是一家有限責任公司企業(yè),以誠信務(wù)實的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團隊、踏實的職工隊伍,努力為廣大用戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品。公司業(yè)務(wù)涵蓋細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體,價格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。上海儒安生物科技順應(yīng)時代發(fā)展和市場需求,通過高端技術(shù),力圖保證高規(guī)格高質(zhì)量的細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體。