細胞轉染過程:X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高，生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋，再與質粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化轉染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細胞/未轉染細胞比率，超過其他RNAi試劑。蛋白轉染試劑配方
LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光，以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后，分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。上海體內轉染試劑原理轉染后6h觀察細胞狀態(tài)，并更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞，用PBS洗滌3次以上，以備RNA抽提。
轉染48小時后，使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進行成像（左側四幅圖），A：LipoD293；B：293fectin；C：Xfect和D：Fugene6.帶有6xHis標記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術實現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進行Coomassie亮藍染色（右上圖E），道1為LipoD293293、道2為標準蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉染試劑產生蛋白質的效率被進一步定量（見右下圖F）。產生慢***的比較通過LipoD293?試劑（升級版）和LipofectamineLTX（LTX）試劑將三個cDNAs共轉染進293T細胞。一個GFP載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1微升（上圖）和10微升（下圖）。
LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優(yōu)點：高轉染效率，適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉染效率高，適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達質粒轉染幾種常見細胞系，通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作，通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。無論有無血清、***存在均可獲得很高的轉染效率。
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉染試劑轉染A549細胞時，實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。試驗采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間，在維持優(yōu)良的細胞活力的同時，實現(xiàn)了p53基因表達水平的有效敲低.功能多樣簡便的實驗方案，易于針對***的細胞系進行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內轉染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內RNAi輸送試劑，可大幅改善實驗性能，使用微克級的siRNA即可達到高達85%的敲低效果。轉染產品知多少——siRNA轉染試劑.非脂質體轉染試劑公司
驚艷登場!臨床級載體生產必備轉染試劑。蛋白轉染試劑配方
圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應的敲低現(xiàn)象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進行注射。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平（Biophen顯色檢測）。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清，并使用顯色法對血清進行分析以確定FVII蛋白的敲低效果。低毒性蛋白轉染試劑配方
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