圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細胞時,實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。試驗采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細胞活力的同時,實現(xiàn)了p53基因表達水平的有效敲低.功能多樣簡便的實驗方案,易于針對***的細胞系進行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實驗性能,使用微克級的siRNA即可達到高達85%的敲低效果。質(zhì)粒細胞轉(zhuǎn)染步驟是什么?轉(zhuǎn)染試劑分裝
轉(zhuǎn)染48小時后,使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進行成像(左側四幅圖),A:LipoD293;B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene6.帶有6xHis標記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術實現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進行Coomassie亮藍染色(右上圖E),道1為LipoD293293、道2為標準蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量(見右下圖F)。產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNAs共轉(zhuǎn)染進293T細胞。一個GFP載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1微升(上圖)和10微升(下圖)。DNA轉(zhuǎn)染試劑報價研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。
轉(zhuǎn)染是將外源核酸導入真核細胞的過程,是細胞和分子生物學研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領域的科研黨們繞不開的話題。然而常常聽到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細胞換液了",真所謂辛辛苦苦實驗N多回,一夜回到解放前……眾所周知,影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多,包括細胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量、微生物污染、轉(zhuǎn)染試劑等。各種細胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同,現(xiàn)實中也并沒有一種放之四海而皆準的方案。
細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學實驗室中**常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法:生物轉(zhuǎn)染,物理轉(zhuǎn)染和化學轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用***等微生物作為基因?qū)胼d體,以慢***、腺***和腺相關***等**常見,其侵染效率可以達到90%以上,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***,無論哪一種都需要特定的設備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都很性感電轉(zhuǎn)化化學轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學研究中**常用的轉(zhuǎn)染方法,主要包括兩類:陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物。其基本原理是利用陽離子的化學分子與帶有負電荷的核酸通過正負電荷作用形成穩(wěn)定的復合物。我們希望把mRNA轉(zhuǎn)染進入原代細胞,那**適合的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品就是Lipofectamine MessengerMAX?或是Neon電轉(zhuǎn)儀。
細胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,適用于各種細胞類型的轉(zhuǎn)染。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑盒
用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.轉(zhuǎn)染試劑分裝
在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。3.細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。轉(zhuǎn)染試劑分裝
上海儒安生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、咨詢、規(guī)劃、銷售、服務于一體的生產(chǎn)型企業(yè)。公司成立于2016-09-20,多年來在細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體行業(yè)形成了成熟、可靠的研發(fā)、生產(chǎn)體系。公司主要經(jīng)營細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體等產(chǎn)品,產(chǎn)品質(zhì)量可靠,均通過醫(yī)藥健康行業(yè)檢測,嚴格按照行業(yè)標準執(zhí)行。目前產(chǎn)品已經(jīng)應用與全國30多個省、市、自治區(qū)。上海儒安生物科技有限公司研發(fā)團隊不斷緊跟細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體行業(yè)發(fā)展趨勢,研發(fā)與改進新的產(chǎn)品,從而保證公司在新技術研發(fā)方面不斷提升,確保公司產(chǎn)品符合行業(yè)標準和要求。上海儒安生物科技有限公司以市場為導向,以創(chuàng)新為動力。不斷提升管理水平及細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體產(chǎn)品質(zhì)量。本公司以良好的商品品質(zhì)、誠信的經(jīng)營理念期待您的到來!