LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。質粒細胞轉染步驟是什么?動物轉染試劑盒
轉染48小時后,使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進行成像(左側四幅圖),A:LipoD293;B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene6.帶有6xHis標記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術實現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進行Coomassie亮藍染色(右上圖E),道1為LipoD293293、道2為標準蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉染試劑產(chǎn)生蛋白質的效率被進一步定量(見右下圖F)。產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNAs共轉染進293T細胞。一個GFP載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1微升(上圖)和10微升(下圖)。DNA轉染試劑公司MagTransf 磁轉染試劑實現(xiàn)高效轉染解析.
在選擇轉染方法時,需考慮您希望輸送的運載物(DNA、RNA或蛋白質)以及您希望轉染的細胞類型。您可通過下表選擇各類陽離子脂質體轉染試劑和Neon轉染系統(tǒng)。我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對自己的結果更加自信.***的輸送效果—可轉染多種類型的細胞無毒性作用—您之所以能看到結果,是因為核酸存在,而不是因為試劑需要的優(yōu)化工作更少—針對大多數(shù)細胞類型提供了快速、簡便的實驗方案連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內狀態(tài)。
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉染效率和極低細胞毒性,在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉染的驗證,尤其針對難轉染細胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細胞轉染帶GFP標記的質粒,A和C是轉染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉染效率更低的細胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉染的細胞株進行轉染,X-tremeGENEHP試劑遠優(yōu)于其他試劑超過350種細胞株的高效轉染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉染試劑正在進行8折促銷哦快去搶購吧~所見即所得——分享兩款超好用的轉染試劑,拯救你的細胞.
產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNAs共轉染進293T細胞。一個GFP載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1微升(上圖)和10微升(下圖)。5天后,細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉導的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由LipoD293?andLTX產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,分為是8x10^6和3x10^6tu/ml。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。上海原代細胞轉染試劑盒
轉染產(chǎn)品知多少:轉染試劑選擇工具.動物轉染試劑盒
細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中**常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用***等微生物作為基因導入載體,以慢***、腺***和腺相關***等**常見,其侵染效率可以達到90%以上,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***,無論哪一種都需要特定的設備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都很性感電轉化化學轉染方法是生物醫(yī)學研究中**常用的轉染方法,主要包括兩類:陽離子脂質體和陽離子聚合物。其基本原理是利用陽離子的化學分子與帶有負電荷的核酸通過正負電荷作用形成穩(wěn)定的復合物。動物轉染試劑盒
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