蛋白質(zhì)翻譯后修飾介紹:蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學修飾過程。蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質(zhì)添加磷酸酯,乙酸酯,酰胺基或甲基等官能團增加蛋白質(zhì)組的功能多樣性,并影響正常細胞生物學和發(fā)病機理的幾乎所有方面。蛋白質(zhì)翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用,如細胞分化、蛋白質(zhì)降解、信號傳導和調(diào)節(jié)過程、基因表達調(diào)節(jié)以及蛋白質(zhì)相互作用。蛋白質(zhì)翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化,糖基化,泛素化,亞硝基化,甲基化,乙?;?,脂質(zhì)化和蛋白水解。因此,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點)在細胞生物學以及疾病診斷和預防研究中至關重要。在技術上,研究翻譯后修飾蛋白的主要挑戰(zhàn)是開發(fā)特異性的檢測和純化方法。山東蛋白質(zhì)氧化修飾組學技術服務
翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學修飾過程。蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質(zhì)添加磷酸酯、乙酸酯、酰胺基或甲基等官能團增加蛋白質(zhì)組的功能多樣性,并影響正常細胞生物學和發(fā)病機理的幾乎所有方面。蛋白質(zhì)翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用,如細胞分化、蛋白質(zhì)降解、信號傳導和調(diào)節(jié)過程、基因表達調(diào)節(jié)以及蛋白質(zhì)相互作用。蛋白質(zhì)翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化、糖基化、泛素化、亞硝基化、甲基化、乙酰化、脂質(zhì)化和蛋白水解。因此,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點)在細胞生物學以及疾病診斷和預防研究中至關重要。貴陽蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學質(zhì)譜分析常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾包括泛素化。
定量N-糖基化蛋白質(zhì)翻譯修飾組學:蛋白質(zhì)的N-糖基化位點修飾是重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾之一,主要在復雜的多細胞或組織形成過程中起關鍵作用。蛋白質(zhì)的N-糖基化修飾位點具有保守的氨基酸序列NX(S/T)(其中X為除脯氨酸以外的其它氨基酸)凝集素親和法是目前糖蛋白質(zhì)組學中應用普遍的分離富集方法。凝集素(lectin)是一類糖結合蛋白質(zhì),能專一識別某一特殊結構的單糖或聚糖中特定的糖基序列而與之結合,它們與糖鏈可逆非共價結合,糖蛋白或糖肽被凝集素捕獲之后,通常用特定的單糖通過競爭結合凝集素將糖蛋白或糖肽洗脫下來。
甲基化修飾蛋白質(zhì)組學技術應用領域:基礎醫(yī)學、臨床診斷:生物標志物,疾病機理機制,疾病分型,個性化治理等;生物醫(yī)藥:藥物作用機理,藥效評價,藥物開發(fā)等;農(nóng)林領域:抗逆脅迫機制,生長發(fā)育機制,育種保護研究等;畜牧業(yè):肉類及乳品質(zhì)研究,致病機理研究等;微生物領域:致病機理,耐藥機制,病原體-宿主相互作用研究等;海洋水產(chǎn):漁業(yè)資源,海水養(yǎng)殖,漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等。技術優(yōu)勢:采用抗體,特異性高;鑒定通量高, 一次可檢測高可達上千個甲基化修飾位點。在眾多乙酰化修飾的蛋白質(zhì)中,研究較多的要數(shù)細胞核中包圍DNA的組蛋白了。
泛素化修飾蛋白質(zhì)組學有些什么?泛素化可以生產(chǎn)出單泛素化或多泛素化蛋白質(zhì)。后者在當7個賴氨酸殘基的泛素與另一個泛素的甘氨酸C端連接形成。這種泛素分子鏈接在生物過程中起到重要的作用。共價結合泛素的蛋白質(zhì)能被蛋白酶識別并降解,這是細胞內(nèi)短壽命蛋白質(zhì)和一些異常蛋白降解的普遍途徑。泛素化及類泛素化蛋白在細胞分裂,自噬,DNA修復,免疫應答,細胞消亡等方面同樣起到關鍵作用。與消化道內(nèi)進行的蛋白質(zhì)水解不同,從泛素與蛋白的結合到將蛋白水解成小的肽段,整個水解過程需要能量參與。人們開始意識到泛素-蛋白酶系統(tǒng)是一個對于真核細胞非常重要的調(diào)節(jié)系統(tǒng)。蛋白質(zhì)翻譯后修飾有什么生物學意義?深圳磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學研究
大多數(shù)翻譯后修飾蛋白以低化學計量和豐度存在,這限制了在分析全細胞裂解液時對其的檢測。山東蛋白質(zhì)氧化修飾組學技術服務
泛素化修飾PRM定量驗證:原理: 泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,調(diào)控包括細胞周期、細胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA 損傷修復以及免疫應答等在內(nèi)的多種細胞活動。首先對泛素化的蛋白進行胰酶消化,在賴氨酸的修飾位點上會產(chǎn)生兩個甘氨酸的殘基(K-GG),利用對泛素化賴氨酸(K-GG)具有高親和力的基序抗體,特異性富集復雜樣本中的泛素化肽段,結合LC-MS/MS蛋白質(zhì)定量方法,實現(xiàn)大規(guī)模泛素化蛋白質(zhì)定性定量分析。山東蛋白質(zhì)氧化修飾組學技術服務