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精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法1.原理:將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù),再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照***版第四版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。3.計(jì)算1).如每個**中方格內(nèi)精子少于10個,應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個**中方格內(nèi)精子在10~40個,應(yīng)計(jì)10個中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個**中方格內(nèi)精子多于40個,應(yīng)計(jì)數(shù)5個中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式:精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域,精子質(zhì)量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。北京馬精子分析W.H.O 4
在精子形態(tài)學(xué)檢查中,通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析,有些特征(細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇,這樣就會引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[10]。4結(jié)論和展望計(jì)算機(jī)輔助**分析具有較好的可靠性、重復(fù)性和穩(wěn)定性,與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡目測估計(jì)相比,更具有快速方便、對比性強(qiáng)、便于交流等明顯優(yōu)點(diǎn)[11],常規(guī)**檢查無法測定精子微細(xì)運(yùn)動特點(diǎn),顯示CASA在男性不育癥診斷篩選中的優(yōu)越性。王益鑫亦發(fā)現(xiàn),部分手工**檢查正常的不育患者,進(jìn)行**全自動分析及生化檢測,均發(fā)現(xiàn)明顯異常[12]。因此,CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗(yàn)方面具有重要的實(shí)際應(yīng)用意義。廣州狗精子分析DCL該設(shè)備還具備良好的售后服務(wù),Hamilton Thorne公司提供培訓(xùn)和技術(shù)支持,確保用戶能夠充分利用設(shè)備的功能。
如何檢查精子活力精子活力是評估男性生育能力的重要指標(biāo)之一。通常,精子活力可以通過**分析、精子運(yùn)動分析和計(jì)算機(jī)輔助精子分析等方法來檢查。這些檢查可以幫助醫(yī)生了解精子的活動能力、形態(tài)和數(shù)量,從而評估男性的生育狀況。1.**分析:這是評估精子活力的基本方法,通過實(shí)驗(yàn)室檢測**樣本,可以測量精子的數(shù)量、活力和形態(tài)。該方法簡單、快速,是初步評估精子活力的常用手段。2.精子運(yùn)動分析:這種方法通過觀察精子在顯微鏡下的移動情況,來評估精子的活動能力。它可以幫助醫(yī)生了解精子的運(yùn)動速度和方向,從而判斷精子是否具有足夠的活力。3.計(jì)算機(jī)輔助精子分析:這是一種更為先進(jìn)的技術(shù),使用計(jì)算機(jī)軟件來分析精子的運(yùn)動參數(shù)。這種方法可以提供更詳細(xì)的數(shù)據(jù),如精子的直線速度、曲線速度和擺動頻率等,有助于更精確地評估精子活力。對于想要檢查精子活力的男性,建議保持良好的生活習(xí)慣,如戒煙、限制飲酒、保持適當(dāng)?shù)倪\(yùn)動和健康的飲食。同時,如果計(jì)劃進(jìn)行生育,應(yīng)盡早進(jìn)行精子活力檢查,并在發(fā)現(xiàn)問題時及時就醫(yī),以便采取相應(yīng)的***措施。
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正常或者不正常,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測量[3]。與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進(jìn)一步增加[7]。精子分析儀節(jié)省時間,提高實(shí)驗(yàn)室的工作效率,讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果。
CASA可將每個精子的活力按以下分級:(1)前向運(yùn)動型(PR):精子運(yùn)動活躍、線性運(yùn)動或者在較大的范圍內(nèi)運(yùn)動。(2)非前向運(yùn)動型(NP):所有其他非前向運(yùn)動的形式,如精子在較小的范圍內(nèi)運(yùn)動,精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動。(3)完全不動型(IM):精子完全不動。CASA系統(tǒng)檢測的這些參數(shù)有一套標(biāo)準(zhǔn)的術(shù)語。(1)VCL=曲線速度(mm/s)。精子頭沿其實(shí)際的曲線,即在顯微鏡下見到的二維方式運(yùn)動軌跡的平均速度。檢測細(xì)胞活力。(2)VSL=直線速度(mm/s)。根據(jù)精子頭在開始檢測時的位置與***所處位置之間的直線運(yùn)動的時間平均速度。(3)VAP=平均路徑速度(mm/s)。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度。(4)ALH=精子頭側(cè)擺幅度(mm)。精子頭沿其空間平均軌跡側(cè)擺的幅度。以側(cè)擺的最大值或平均數(shù)值表示。(5)LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。(6)WOB=擺動性。精子頭沿其實(shí)際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性??臻g平均路徑的直線性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打頻率(Hz)。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率。(9)MAD=平均移動角度(度)。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時間平均***值。IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動識別和計(jì)算精子的各項(xiàng)參數(shù),減少了人工操作的誤差??焖龠\(yùn)動精子分析W.H.O 4
精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運(yùn)動的時均速率。北京馬精子分析W.H.O 4
醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當(dāng)今醫(yī)學(xué)科學(xué)知識、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來完成的。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準(zhǔn)確的分析結(jié)果[5]。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點(diǎn)在于:①當(dāng)CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式(溫度、稀釋法、緩沖液)確定時?通過個體內(nèi)和個體間的比較?CASA的精子活力重復(fù)性明顯好于直觀評估[6]。②實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法[6]?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫的過程無錯誤發(fā)生?可清楚準(zhǔn)確地打印出結(jié)果。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫、能夠?qū)?**前和***后測定的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較[9]、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存、每天的標(biāo)本測試記錄以及許多其他報(bào)告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計(jì)算機(jī)中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學(xué)檢查中?通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析[7]?這些特征(細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[8]。就形態(tài)學(xué)分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于CASA分析。北京馬精子分析W.H.O 4