微型數(shù)字ELISA檢測

抗體篩選芯片的正交驗證能力，抗體篩選芯片支持同一反應(yīng)體系下不同樣本的交叉反應(yīng)測試，為抗體的正交驗證提供了高效平臺。在篩選IL-6抗體對時，可同時測試8種捕獲抗體與8種標(biāo)記抗體的組合，通過陰性質(zhì)控品與陽性質(zhì)控品的比值分析，快速排除非特異性配對，篩選出親和力常數(shù)（KD）<10??M的高特異性抗體。該能力在復(fù)雜樣本（如含有異嗜性抗體的血清）檢測中尤為重要，可提前識別潛在干擾因素，提升診斷試劑盒的臨床適用性。此外，芯片的低密度陣列設(shè)計（如3×7排列）便于后續(xù)單克隆抗體的克隆化篩選，形成從初步篩選到精細優(yōu)化的完整技術(shù)鏈條，加速抗體藥物與診斷試劑的研發(fā)周期。5）數(shù)字化高敏ELISA芯片試劑盒，微量樣本可同時測2-4個指標(biāo)；微型數(shù)字ELISA檢測

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數(shù)字ELISA檢測血液中的蛋白質(zhì)，對接受治理性前列腺切除術(shù)（RP）的患者血清樣本中的PSA進行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具，也用于監(jiān)測住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后，絕大多數(shù)PSA被消除，水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測方法的檢測限（3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測前列腺病的復(fù)發(fā)，但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會被發(fā)現(xiàn)。 創(chuàng)新性數(shù)字ELISA檢測單分子陣列化結(jié)構(gòu)使每個磁珠成為反應(yīng)單元，放大信號，降低檢測下限。

   芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列（圖1C）我們稱之為單分子陣列（SiMoA）——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標(biāo)記的單個蛋白質(zhì)分子。在這個單分子免疫測定的第一步（圖1A)，在微球（直徑μm）上形成一個三明治抗體復(fù)合物，結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記，如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品，蛋白質(zhì)的比值分子（以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物）與微球的比例很?。ㄍǔＰ∮?：1)，因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布，導(dǎo)致單個微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如，如果在(3000個分子）的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì)，并且在200，000個微球上進行標(biāo)記，則珠子，然后，。無法檢測到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測技術(shù)（例如，平板閱讀器）的標(biāo)簽，因為熒光染料由每種酶生成的產(chǎn)物擴散到一個大卵試驗體積（通常為)，并進入其中需要數(shù)十萬種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號背景。

   創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測產(chǎn)品。循環(huán)血液轉(zhuǎn)化為~2×10?15M（或2飛摩爾，fM)；早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒，相當(dāng)于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M（50attomolar，aM)到15×10?15M（15fM）10.嘗試開發(fā)能夠測量這些蛋白質(zhì)濃度的方法集中在蛋白質(zhì)上的核酸標(biāo)記復(fù)制，11,12或測量整體、結(jié)合標(biāo)記蛋白分子的性質(zhì)13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標(biāo)記物，已將蛋白質(zhì)的檢測范圍擴展至低飛摩爾水平；更近使用該技術(shù)的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達到的靈敏度然而，檢測蛋白質(zhì)仍然落后于核酸，如聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），從而限制了蛋白質(zhì)組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質(zhì)分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質(zhì)s1,2提供了一種有希望的方法。芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品，多重檢測，同一樣本就能測試2-6項指標(biāo)；

結(jié)核病活動期的高靈敏篩查方案：針對結(jié)核桿菌***早期細胞因子表達極低的特點，芯棄疾芯片通過超敏數(shù)字ELISA技術(shù)（檢測限0.2pg/mL）實現(xiàn)IL-6、IL-18等標(biāo)志物的精細檢測。在活動性結(jié)核患者中，血清IL-6水平***高于潛伏***組（中位數(shù)12.5pg/mLvs.1.8pg/mL，p<0.01），聯(lián)合VEGF（>30pg/mL）與IP-10（>150pg/mL）檢測可提高診斷特異性至98%。芯片支持連續(xù)監(jiān)測（每周1次），動態(tài)追蹤***響應(yīng)（如抗結(jié)核***4周后IL-6下降>50%提示有效），誤診率從傳統(tǒng)方法的15%降至5%以下。在耐藥結(jié)核篩查中，芯片可檢測利福平耐藥相關(guān)蛋白（rpoB突變），指導(dǎo)個體化用***案，***成功率提升30%。全自動圖像分析軟件通過四參數(shù)擬合，自動計算濃度值，相關(guān)系數(shù)達 0.999 以上。POCT數(shù)字ELISA檢測速度快

芯棄疾JX-8B單分子普惠化ELISA檢測產(chǎn)品，微量檢測，使用10uL樣本就能測試；微型數(shù)字ELISA檢測

急診標(biāo)志物檢測：POCT芯片的性能突破，在急診**標(biāo)志物檢測中，POCT芯片實現(xiàn)了靈敏度與速度的雙重突破。針對心肌損傷標(biāo)志物cTnI，其比較低檢測限達10pg/ml，線性范圍0-1000pg/ml，15分鐘內(nèi)即可出具結(jié)果，為急性心梗的早期排除與確診提供了“黃金時間”內(nèi)的關(guān)鍵數(shù)據(jù)。在***性疾病中，PCT檢測靈敏度10pg/ml，覆蓋0-3810pg/ml的臨床關(guān)注區(qū)間，助力快速鑒別細菌***與病毒***，指導(dǎo)***合理使用。該芯片的小型化設(shè)計適配急診床旁檢測，配合自動化系統(tǒng)，可同時檢測心肌酶、炎癥因子、凝血指標(biāo)等多個項目，為EICU、院前急救提供一站式檢測解決方案，***提升危重癥救治的時效性與準(zhǔn)確性。微型數(shù)字ELISA檢測