單分子檢測數(shù)字ELISA

創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景：適合生物實驗室、醫(yī)學實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測產(chǎn)品。

我們繼續(xù)在兩個關(guān)鍵領(lǐng)域改進SiMoA技術(shù)。首先，在兩個關(guān)鍵領(lǐng)域可能再增加兩個靈敏度等級基于對酶標記的敏感性（圖2）可以檢測蛋白質(zhì)，如果非特異性相互作用可以更小化背景信號。單個珠子上分離和詢問單個分子的能力為區(qū)分抗體-抗原結(jié)合事件和非特異性結(jié)合復(fù)合物。其次，我們簡化了檢測的物流。然而，即使在目前的形式下，我們相信數(shù)字ELISA有可能促進疾病的早期診斷和治理。 數(shù)字 ELISA 芯片采用高透光基底與表面涂層，減少非特異性吸附，提升磁珠捕獲效率。單分子檢測數(shù)字ELISA

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列（圖1C）我們稱之為單分子陣列（SiMoA）——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學和抑制作用。我們的目標是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標記的單個蛋白質(zhì)分子。在這個單分子免疫測定的第一步（圖1A)，在微球（直徑μm）上形成一個三明治抗體復(fù)合物，結(jié)合的復(fù)合物用酶標記，如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當測定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品，蛋白質(zhì)的比值分子（以及由此產(chǎn)生的酶標記復(fù)合物）與微球的比例很?。ㄍǔＰ∮?：1)，因此含有標記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布，導(dǎo)致單個微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如，如果在(3000個分子）的蛋白質(zhì)中捕獲并標記了50μM的蛋白質(zhì)，并且在200，000個微球上進行標記，則珠子，然后，。無法檢測到這些低數(shù)量的酶使用標準檢測技術(shù)（例如，平板閱讀器）的標簽，因為熒光染料由每種酶生成的產(chǎn)物擴散到一個大卵試驗體積（通常為)，并進入其中需要數(shù)十萬種酶標簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號背景。 單分子技術(shù)數(shù)字ELISA靈活使用現(xiàn)有平臺就能做的單分子免疫檢測；

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

珠子以兩種不同的方式讀出。首先，在與100μMresorufin-阝-D孵育1小時后，用熒光板讀出器以100μL方式讀出珠子結(jié)合-半乳糖苷（RGP），一種熒光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板閱讀器上，檢測限為15fMofS阝G（圖2）。其次，將珠子加載然后將RGP溶液密封到陣列的孔中，單個酶的信號被允許在反應(yīng)室中積累，并每30秒獲取一次熒光圖像。實驗結(jié)束時獲取陣列的白光圖像以識別含有珠子的孔（含有珠子的孔散射光與空井不同）。熒光圖像用于確定哪些微球具有相關(guān)的結(jié)合酶（從時間變化的熒光圖像中強度增加）。圖2顯示了微球中含酶的比例與總體S阝G濃度的關(guān)系的對數(shù)-對數(shù)圖。檢測到的比較低酶偶聯(lián)物濃度為350飛摩爾（zM），并通過外推信號等于的酶濃度計算得出的檢測限（LOD）。

芯棄疾JX-8B數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品；應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測產(chǎn)品。生物實驗室、醫(yī)學實驗室常見問題：多指標（如細胞因子）要檢測多次；常規(guī)檢測方法（ELISA、化學發(fā)光）等，不能進行多重檢測；同一個樣本要測試多個指標，就得測試多次，即增加成本、時間，也浪費了樣本和試劑。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品；先進新型的單分子檢測方法的普及版；每個生物/醫(yī)學實驗室都用得起的單分子免疫檢測；使用現(xiàn)有平臺就能做的單分子免疫檢測；
抗體篩選芯片高密度檢測區(qū)設(shè)計，支持多種反應(yīng)條件同步測試，加速高親和力抗體篩選。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品具有微量的優(yōu)勢：

微量：芯片上反應(yīng)，流道區(qū)只有幾十微米高度，極大降低試劑、樣本用量；微量試劑檢測：更少只需10ul樣本、試劑只為常規(guī)的1/10；

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品具有靈活的優(yōu)勢：

靈活：可手動、可只使用8孔芯片，總成本、更小實驗成本均較低，搭配使用常用實驗室小型設(shè)備即可使用

測試結(jié)果：寬波長掃描儀結(jié)果-明場+熒光場同時看到磁珠與熒光，可觀測每個磁珠上免疫反應(yīng)的程度

先進新型的單分子檢測方法的普及版 數(shù)字化高敏ELISA芯片，可以進行8孔、4孔的靈活檢測。單分子陣列數(shù)字ELISA準確寬

芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品，微量樣本可同時測2-4個指標；！單分子檢測數(shù)字ELISA

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

人類形式的蛋白質(zhì)被加入到25%牛血清中以代替臨床測試樣本；通常使用四倍稀釋因子以減少免疫測定中的基質(zhì)效應(yīng)4。使用數(shù)字ELISA檢測25%血清中的PSA，從該實驗中確定了LOD為~50aM（1.5fg/mL），相當于整個血清中的LOD為~200aM（6fg/mL）。檢測到的比較低濃度為250aM，相當于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通過外推背景濃度來確定的加上背景的三個標準差，不同運行的LOD取決于背景的CV。在具有典型背景方差的幾個實驗中，全血清PSA的亞飛摩爾LOD得以保持。相比之下，一種前列的商業(yè)PSA檢測方法(ADVIACentaur，西門子）報告在人血清中的LOD為3pM（0.1ng/mL），并且已經(jīng)報道了LOD在10-30fM17,26。 單分子檢測數(shù)字ELISA