芯棄疾單分子數(shù)字ELISA靈活

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

我們已經(jīng)開發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測方法——前列腺特異性抗原（PSA）和腫瘤壞死因子α（TNF-α），以確定高酶標(biāo)記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗的關(guān)鍵參數(shù)是：珠子濃度和兩種標(biāo)記試劑（檢測試劑和酶偶聯(lián)物）的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個相互競爭的因素。首先，足夠的珠子必須在場以從熱力學(xué)和動力學(xué)中捕獲大部分目標(biāo)分析物從熱力學(xué)角度看，100μL中有20萬個珠子，每個珠子大約有8萬個與之結(jié)合的抗體25相當(dāng)于約0.3nM的抗體濃度，在該濃度下，抗體-蛋白平衡導(dǎo)致高捕獲效率（>70%）(D.M.R.，E.P.F.，D.C.D.，未發(fā)表工作）。 自動版數(shù)字 ELISA 芯片配套全自動加樣儀與掃描儀，單個芯片支持≥8 樣本同時反應(yīng)，總時長 30 分鐘。芯棄疾單分子數(shù)字ELISA靈活

創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景：適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測產(chǎn)品。

根據(jù)目標(biāo)蛋白的抗體制備了功能化的微球生產(chǎn)商說明。含有目標(biāo)蛋白的100-μL測試溶液與200,000個磁珠懸浮液孵育2小時至23°C。然后將磁珠分離并用PBS和0.1%Tween-20洗滌三次。磁珠重新懸浮后與含有檢測抗體（通常約為1nM)的溶液孵育45分鐘。在23°C下**小值。然后將珠子分別用PBS和0.1%洗滌三次。Tween-20。將珠子與含有SβG（1–50pM)的溶液在23°C孵育30分鐘，然后分離并在PBSand0.1%Tween-20中洗滌六次。隨后將珠子重懸于10μLofPBS中，并加載到飛升液位陣列中。整個實驗的總時間約為~6小時。 單分子陣列數(shù)字ELISA單分子POCT產(chǎn)品-數(shù)字化ELISA芯片，幫您數(shù)字化高靈敏檢測，且微量樣本多重指標(biāo)檢測；

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品；將傳統(tǒng)的模擬信號轉(zhuǎn)化為新型的數(shù)字化信號；創(chuàng)新型原理，有效提高檢測靈敏度，可達(dá)fg/aM級！
陣列芯片原理：從15μLof基質(zhì)中的500,000個珠子開始。結(jié)果表明，陣列圖像的定量分析大約一半的孔在珠子沉降幾分鐘后被占據(jù)。對于SimoaHD-1分析儀，沉降時間減少到90秒，分布在三個儀器處理周期之間。隨著珠子重新沉降到陣列中，儀器對其他操作（密封和成像）進(jìn)行索引，這些操作已經(jīng)加載到陣列上。通常，會檢測25,000-50,000個珠子。由于Simoa中的測量單位（AEB）是一個比率，一定珠裝載量的差異不影響數(shù)據(jù)質(zhì)量或在大多的范圍內(nèi)保持精度，前提是存在足夠的珠子數(shù)量以保持在泊松噪聲水平之上。22數(shù)據(jù)質(zhì)量會受到影響，當(dāng)泊松噪聲主導(dǎo)測量誤差時。這發(fā)生在與背景相關(guān)的正井?dāng)?shù)量降至約50個珠子以下時，此時泊松噪聲明顯影響測量的變異系數(shù)（CV）。

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列（圖1C）我們稱之為單分子陣列（SiMoA）——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標(biāo)記的單個蛋白質(zhì)分子。在這個單分子免疫測定的第一步（圖1A)，在微球（直徑μm）上形成一個三明治抗體復(fù)合物，結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記，如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品，蛋白質(zhì)的比值分子（以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物）與微球的比例很?。ㄍǔＰ∮?：1)，因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布，導(dǎo)致單個微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如，如果在(3000個分子）的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì)，并且在200，000個微球上進(jìn)行標(biāo)記，則珠子，然后，。無法檢測到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測技術(shù)（例如，平板閱讀器）的標(biāo)簽，因為熒光染料由每種酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個大卵試驗體積（通常為)，并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號背景。 6）數(shù)字化高敏ELISA芯片試劑盒，10ul樣本可同時測2-4個指標(biāo)；

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數(shù)字ELISA檢測血液中的蛋白質(zhì)，對接受治理性前列腺切除術(shù)（RP）的患者血清樣本中的PSA進(jìn)行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具，也用于監(jiān)測住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后，絕大多數(shù)PSA被消除，水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測方法的檢測限（3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測前列腺病的復(fù)發(fā)，但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會被發(fā)現(xiàn)。 芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產(chǎn)品，極速檢測，檢測用時只需要 15-30min！創(chuàng)新性數(shù)字ELISA試劑開放

芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品，每個生物實驗室都能用的單分子檢測；芯棄疾單分子數(shù)字ELISA靈活

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

珠子以兩種不同的方式讀出。首先，在與100μMresorufin-阝-D孵育1小時后，用熒光板讀出器以100μL方式讀出珠子結(jié)合-半乳糖苷（RGP），一種熒光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板閱讀器上，檢測限為15fMofS阝G（圖2）。其次，將珠子加載然后將RGP溶液密封到陣列的孔中，單個酶的信號被允許在反應(yīng)室中積累，并每30秒獲取一次熒光圖像。實驗結(jié)束時獲取陣列的白光圖像以識別含有珠子的孔（含有珠子的孔散射光與空井不同）。熒光圖像用于確定哪些微球具有相關(guān)的結(jié)合酶（從時間變化的熒光圖像中強(qiáng)度增加）。圖2顯示了微球中含酶的比例與總體S阝G濃度的關(guān)系的對數(shù)-對數(shù)圖。檢測到的比較低酶偶聯(lián)物濃度為350飛摩爾（zM），并通過外推信號等于的酶濃度計算得出的檢測限（LOD）。 芯棄疾單分子數(shù)字ELISA靈活