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來源: 發(fā)布時間:2025-07-29

HE染色分化作用:染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后,必須用0.5%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去,在進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此,在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步。返藍(lán)作用:分化之后,蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,再用弱堿性水(0.2%氨水)使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),但所需時間較長。HE染色小攻略技巧分析。內(nèi)蒙古質(zhì)量好的HE染色服務(wù)

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HE染色注意事項:1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長,組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此,要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后,分色這一步是關(guān)鍵,應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,一般以細(xì)胞核染色清楚(晰)而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導(dǎo)致染色太淺,應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后,入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),此為脫水不徹底,應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,更換酒精、二甲苯,以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮、變形,影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前,切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時,要用中性樹脂,防止日后褪色,蓋片要選大于組織塊的面積,如漏出一部分不久將會褪色,所用樹脂濃度要適當(dāng),樹脂封固時不能有氣泡。新疆性價比高的HE染色外包什么是HE染色,HE染色實驗的目的。

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HE染色法,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。去氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中稱藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結(jié)合使胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點均可顯示出來。

HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經(jīng)過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進(jìn)行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進(jìn)行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。肺部組織HE染色如何觀察。

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HE染色注意事項:1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,否則無論進(jìn)行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分,若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。  2.蘇木素染液使用一段時間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會減弱,著色不鮮艷,呈灰藍(lán)色時應(yīng)及時更換新液。  3.染色的時間長短需依據(jù):染劑對組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。  4.分化十分重要。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過淡,過深等現(xiàn)象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復(fù)染后,組織會呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象。  5.還原液不宜過濃,若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。  6.伊紅宜淡染,復(fù)染過深胞核會不清晰,影響鏡檢。 石蠟組織切片的HE染色。四川HE染色公司

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HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法:1)二甲苯使用過久,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗證。2)切片經(jīng)烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低;延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少,幅度太??;可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久,導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去,在切片染色完成后留下了點狀的不著**域):更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳(偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符):換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯:需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯:需重新配置驗證。8)烤片時間短,切片上水分沒有烤干,也會導(dǎo)致著色不勻,出現(xiàn)點狀發(fā)白區(qū)域。內(nèi)蒙古質(zhì)量好的HE染色服務(wù)